发酵培养基灭菌_培训课件.pptVIP

* （2）附属设备的灭菌 分空气过滤器：发酵罐灭菌之前灭菌，灭菌后空气吹干备用。 补料系统：根据补料不同而异。 补料管路：与补料罐同时灭菌，保温时间1小时。 消沫剂系统：蒸汽压力0.15MPa，保温30分钟。 消沫剂管路：与补料罐同时灭菌，保温时间1小时。 移种管路：蒸汽压力0.30—0.45MPa，保温时间1小时。 * Thank you！ END * (二)培养基的连续灭菌（连消） 将配置好的培养基在向发酵罐等培养装置输送的同时进行加热、保温、和冷却而进行灭菌。 * 连续灭菌时，培养基可在短时间内加热到保温温度，并且能很快地被冷却 因此可在比间歇灭菌更高的温度下进行灭菌。 而由于灭菌温度很高，保温时间就相应地可以很短,极有利于减少培养基中的营养物质的破坏。 培养基连续灭菌过程中的温度的变化 * 连续灭菌的基本设备有哪些 ？ 问题 * ●配料预热罐：配料罐将培养基预热60-70℃，防止培养基在杀菌时料液与蒸汽温度相差过大而产生水汽撞击声。 ●连消塔（加热塔）：使高温蒸汽与培养基迅速接触混和，使培养基迅速升高到灭菌温度（126-132 ℃）。 ●维持罐：使培养基在灭菌温度下保持5-7min，以达到灭菌的目的； ●冷却管：将培养基迅速冷却到40-50 ℃，输送到灭菌后的发酵罐内。 1、连消塔式灭菌流程 * 发酵罐 蒸汽 蒸汽 冷却水 无菌培养基 配料罐 泵 加热塔 维持罐 冷却管 可在专门的预热罐，也可用配料罐兼作 温 度：一般预热至70℃左右 预热的物料用泵泵入连消装置 输料泵： 常用 旋涡泵、往复泵、螺杆泵 ①预热 * 旋涡泵 往复泵 螺杆泵 * ②加热 物料泵入加热器，培养基与蒸汽混合，温度迅速上升至130～140℃ 常用连消装置有三类： 套管式连消器 汽液混合式连消器 喷射式加热器 * 套管式连消塔 上疏下密，45°小孔，孔径6毫米左右 培养液流动线速度小于0.1m/s ; 在管内逗留时间为15～20秒 * 汽液混合式连消器 * ③保温 保温设备 （维持设备） 保温材料包裹 两种形式：罐式；管式 * 维持罐 * 培养基的平均停留时间 ? = V / FM ---平均停留时间 （s） V--- 维持罐的体积 （ m3） FM --- 培养基的流量 （m3/s） * Note: 培养基在维持罐的流动不可能非常均匀，可能产生沟流，造成一部分培养基在罐内的停留时间少于平均值。为保证灭菌彻底，在设计罐式维持器时，通常取平均停留时间的3～5倍。 经验： 在灭菌温度为130℃时，实际平均时间可取10分钟；在140℃时则可取3～4分钟。 * 管式维持器 在设计管式维持设备时，须采用停留时间分布的概念，而不能采用单纯的停留时间。 * 圆管内不同流动形式流体的速度分布情况 湍流 Vaverage = 0.82 Vmax 活塞流 Vaverage = Vmax 粘滞流 Vaverage = 0.5 Vmax * 在管式维持器中，若培养基流动为活塞流，可根据维持管的内径、培养基的流量求出管长。 但实际上培养基不可能呈活塞流，当培养基处于粘滞留状态时，管内速度呈抛物线，管中心部位的最大流速为平均流速的2倍；若以平均流速确定管长，则会造成边缘部分的培养基过热（加热过长）。 确定维持管的长度，应采用扩散模型 ( Dispersion model) . （复杂，略） * ④冷却 喷淋冷却器 板式冷却器 真空冷却器 * 喷淋冷却器 结构简单；广泛使用 * 喷射加热-真空冷却连续灭菌流程 * 喷射加热连续灭菌流程 灭菌介质 原料介质 蒸汽 T=140度 保温段 真空 流程中采用了蒸汽喷射器，它使培养液与高温蒸汽直接接触，从而在短时间内可将培养液急速升温至预定的灭菌温度然后在该温度下维持一段时间灭菌，灭菌后的培养基通过一膨胀阀进入真空冷却器急速冷却，从图中可以看出，由于该流程中培养基受热时间短，营养物质的损失也就不很严重，同时该流程保证了培养基物料先进先出，避免了过热或灭菌不彻底等现象。 2、喷射加热连续灭菌流程 * 1 喷嘴 2 吸入口 3 吸入室 4混合喷嘴 5 混合段 6扩大管 喷射加热器 * * 薄板换热器连续灭菌流程 进料 35℃ 100 ℃ 120 ℃ 维持罐120 ℃ 蒸汽147 ℃ 120 ℃ 55 ℃ 出料35 ℃ 水20 ℃ 31 ℃ 流程中采用了薄板换热器作为培养液的加热和冷却器，蒸汽在薄板换热器的加热段使培养液的温度升高，经维持段保温一定时间后，培养基在薄板换热器的冷却段进行冷却，从而使培养基的预