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关于梅毒的实验室检测 成都商报在2007年5月9日第5版中有这样一篇文章—“是梅毒,是没‘毒’ 女大学生考警蹊跷被刷”。讲的是小梅在淮南市第一人民医院进行考警体检中被误诊(或是错诊)为梅毒的事。其报道中对梅毒的实验室检查部份的叙述存在一定程度的误导,因此我们针对梅毒的病原体、实验室检查及检验方法等相关内容进行了组稿。来进一步加深对梅毒实验室诊断的认识。
一、 螺旋体的分类、寄生部位
螺旋体的分类及传播方式
属
致病性螺旋体种类
传播方式或媒介
所致疾病
螺旋体
?
?
?
脊螺旋体
?
?
?
密螺旋体
梅毒螺旋体
性传播
梅毒
?
雅司螺旋体
皮肤损伤
雅司病
?
品他螺旋体
皮肤损伤
品他病
?
地方性螺旋体
粘膜损伤
地方性梅毒
疏螺旋体
伯氏疏螺旋体
硬蜱
莱姆病
?
回归热螺旋体
体虱
流行性回归热
?
赫姆疏螺旋体
软蜱
地方性回归热
?
奋森疏螺旋体
机会感染
多种口腔感染
钩端螺旋体
问号钩端螺旋体
皮肤粘膜
钩端螺旋体病
细丝体
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短螺旋体
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小蛇形螺旋体
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二、 生物学特性
梅毒螺旋体即苍白密螺旋体的苍白亚种,人是其唯一宿主。直径0.1—0.15μm,全长7--8μm。在电镜下可见有细胞壁和细胞膜。新鲜标本在暗视野显微镜下可观察其形态和活泼的运动方式。
梅毒螺旋体主要有两种抗原:1、密螺旋体抗原即梅毒螺旋体表面的特异抗原,与雅司、地方性梅毒、品他病等3种密螺旋体有共同抗原,可交叉反应。2、非螺旋体抗原即磷脂类抗原,可刺激机体产生反应素,其与牛心肌的心脂质抗原发生反应,此法敏感性高,但有假阳性。
梅毒螺旋体对外界的抵抗力极弱,离体后1—2小时即死亡,对热和干燥特别敏感,在体外干燥环境下1—2小时或加1.5℃经1小即死亡。血液中4℃放置3天可死亡,因此4℃血库存放3天以上的血液无传染梅毒的危险。对肥皂水和常用化学消毒剂亦敏感,1%--2%石炭酸内数分钟就死亡。
梅毒的免疫属感染性免疫,有梅毒螺旋体感染时才有免疫力,一旦螺旋体被杀灭,其免疫力随之消失。机体对梅毒螺旋体感染可产生细胞免疫和体液免疫反应,体液免疫中有两种抗体:一种是梅毒特异性抗体,主要是IgG、IgM,对螺旋体有制动作用,当有补体存在时,可将其杀死和溶解,对机体的再感染有保护作用。另一种是抗脂质抗体的反应素,为IgG和IgM的混合物,对机体无保护作用。
三、 送检标本和检验方法
Ⅰ期梅毒病人取硬下疳渗出液,Ⅱ期梅毒取梅毒疹渗出液或局部淋巴抽出液。对Ⅰ期梅毒末期以后(大约感染3—4周以后)的病人可分离血清检查有无梅毒螺旋体抗体和反应素。
检验方法:
1、? 显微镜镜检 渗出液涂片后可直接用暗视野显微镜检。直接镜检适合ⅠⅡ期梅毒的检查。(现已经不常用)
2、? 血清学试验 包括非螺旋体抗体和密螺旋体抗体两类
1)? 非螺旋体抗体试验(NtrAT) 用正常牛心肌脂质作为抗原,测定病人血清中的反应素。均为初筛试验。
2)? 密螺旋体抗体试验(TrAT) 采用Nichols株梅毒螺旋体作为抗原,测定血清中梅毒螺旋体特异抗体,特异性强,可用作梅毒证实试验。
试验方法分类
类型
试验名称
NtrAT
(测抗类脂抗体)
VDRL(性病研究实验室试验)
RPR(快速血浆反应素试验)
TRUST(甲苯胺红不加热血清试验)
USR(不加热血清反应素试验)
TrAT
(测抗T.pallidum抗体)
TPHA(梅毒螺旋体血凝试验)
TPPA(梅毒螺旋体明胶凝集试验)
TP- ELISA(酶联免疫法)
FTA-ABS(荧光密螺旋体抗体吸收试验)
WB(免疫印迹试验)
金标记免疫层析法
1.??? ?非螺旋体抗体试验(NtrAT)? 这类方法敏感性高,其抗体滴度与病变活动性有关,病灶出现后1-2周就可测出反应素,Ⅰ期梅毒阳性率约为70%,Ⅱ期梅毒阳性率可达100%,Ⅲ期梅毒阳性率较低,先天性梅毒阳性率可达80%-100%,但此类试验特异性不高,常有假阳性反应。因此,在分析结果时应结合病史和临床症状,并做密螺旋体抗原试验加以确诊。
2.??? ?密螺旋体抗体试验(TrAT)?
1) TPHA(梅毒螺旋体血凝试验) 是一种间接血凝试验,以SRBC为载体,将梅毒螺旋体Nichols株,经纯化后超声击碎成密螺旋体抗原,致敏SRBC,加入待检病人血清作间接血凝试验,具有敏感性高,快速,简便,易于观察等特点。
2) TPPA(梅毒螺旋体明胶凝集试验)与TPHA基本相同。
3) WB(免疫印迹试验) 是分子水平的试验,本法综合了SDS的高分辩力和ELISA的高特异性和敏感性,对梅毒的确诊,尤其对早期梅毒的确诊具有特殊的价值,对二期,三期梅毒的诊断率很高。
4) FTA-ABS(荧光密螺旋体抗体吸收试验)为间接荧光抗体检测法
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