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维生素C含量测定方法综述 摘要 目前研究维生素C测定方法的报道较多，如滴定法、光度分析法、高效液相色谱法等，各种方法各有特点。特别是高效液相色谱法是近年来发展较快的一种方法。本文对近年来有关维生素C的测定方法进行了综述。 关键词 维生素C 滴定法 光度分析法 高效液相色普法等 概述 维生素C是可溶于水的无色结晶，是一种分子结构最简单的维生素。维生素C有防治坏血病的功能，所以在医药上常把它叫做抗坏血酸。维生素C能保持巯基酶的活性和谷胱甘肽的还原状态，起解毒作用等。其广泛存在于植物组织中，新鲜的水果、蔬菜，特别是枣、辣椒、苦瓜、柿子叶、猕猴桃、柑橘等食品中含量尤为丰富。准确测定维生素C的含量，对饮食健康、医疗保健都具有十分重要的意义。近年来报道的测定方法主要有滴定法、光度法、高效液相色谱法等。 维生素C的结构式 维生素C：六碳的多羟基内酯 1 滴定法测定维生素C 1.1 2，6一二氯靛酚法 1.2 微量滴定法  ——2，6-二氯靛酚法  ——2，6-二氯靛酚法 碘量法 碘量法 碘的浓度由已知浓度的Na2S2O3标准溶液标定 反应式： 计算式： Wvc=C(I2)V(I2)M(vc)/m(vc ) *100% 碘量法 注意 ！ 测定时：加HAC使溶液呈弱酸性 原因: (1) Vc还原性很强，在空气中很容易被氧化，在碱性介质中更甚 (2)I2在碱性介质中会发生歧化反应 加HAC可减少VC的副反应，避免实验误差 电位滴定法 原理：根据滴定过程中电池电动势的变化来确定反应终点. Pt为指示电极，甘汞作参比电极 E池＝E+-E-+E液接电位＝EI2/I-+k(常数) 电位滴定法 原理(具体来说:) 随着滴定剂的加入，由于发生化学反应，待测离子浓度将不断变化； 从而指示电极电位发生相应变化； 导致电池电动势发生相应变化； 计量点附近离子浓度发生突变；引起电位的突变，因此由测量工作电池电动势的变化就能确定终点。 电位滴定法 右图：电位滴定法基本仪器装置 计算式：(与碘量法相同) Wvc=C(I2)V(I2)M(vc)/m(vc ) *100% 优点： 解决了滴定分析中遇到有色或浑浊溶液时无法指示终点的问题 2 分光光度测定维生素C 2.1 2，4一二硝基苯肼分光光度法 2.2 钼蓝比色法 2.3 其他方法 2，4一二硝基苯肼分光光度法 原理： 维生素C在空气中尤其在碱性介质中极易被氧化成脱氢抗坏血酸 反应式： 2，4一二硝基苯肼分光光度法 pH5,脱氢抗坏血酸内环开裂，形成二酮古洛糖酸 二酮古洛糖酸 2, 4一二硝基苯肼分光光度法 脱氢抗坏血酸，二酮古洛糖酸均能和2，4－二硝基苯肼生成可溶于硫酸的脎 脎在500nm波长有最大吸收 脎的结构： 分光光度法 样品溶液与VC标准溶液按上述方法同样处理 500nm处测吸光度 下图：721型分光光度计 钼蓝比色法 马占玲等用钼蓝比色法测定青椒中还原型维生素C含量的基本原理和方法。测定波长839 nm，维生素C含量在0．004～0．024 mg／mL范围内呈线性关系，回收率为97．2％。该方法简单、快速、准确。 钼蓝比色法 逯家辉等提出了一种测定维生素C的新方法，它是基于Folin B试剂与抗坏血酸在pH=3的三氯乙酸酸性介质中反应生成脱氢抗坏血酸，反应产物在910 nm波长处有最大吸光度进行定量分析。该方法的线性范围为0～50．0μg／mL，相关系数r=0．999 86，回收率为98．12％～102．15％。  ——差示旋光法  ——差示旋光法  ——差示旋光法 ——差示旋光法  ——差示旋光法 ——差示旋光法  ——差示旋光法  ——差示旋光法  ——差示旋光法 ——差示旋光法 3 高效液相色谱法测定维生素C 3.1 HYPERSIL—C8色谱柱法 3.2 VenusilXBP—C18柱法 3.3 其他方法 HYPERSIL—C8色谱柱法 采用HYPERSIL—C 8色谱柱，用0．1％低浓度的草酸作流动相，陈昌云等采用0．05 mol／L磷酸二氢钾缓冲液：甲醇=80：20 (v／v)作流动相。流速为1．0mL／min，二极管阵列检测器，检测波长为254 nm。 3.2 VenusilXBP—C18柱法 系统采用VenusilXBP—C18柱(4．6x250 mm，5μg)，用0．2％的偏磷酸的水溶液作为流动相，流速1 ml／min，检测波长240 nm；维生素C浓度在0．1-1．0 mg／mL范围内有良好的线性关系。该方法回收率99．89％，标准偏差0．91，