生物光子学5-04课案.ppt

post-translational modifications，翻译后修饰，转录后修饰 FLIM-FRET的结果：供体的荧光寿命缩短 文章被引用525次 * * * Quenching淬灭 是指荧光物质分子与溶剂分子或其他溶质分子相互作用引起荧光强度降低的现象。 引起荧光熄灭的物质称为荧光熄灭剂。 如，卤素离子、重金属离子、氧分子以及硝基化合物、重氮化合物、羧基和羰基化合物均为常见的荧光熄灭剂。 荧光淬灭的原因： 　　①因荧光物质的分子和熄灭剂分子碰撞而损失能量； 　　②荧光物质的分子与熄灭剂分子作用生成了本身不发光的的配位化合物； 　　③溶解氧的存在，使得荧光物质氧化，或是由于氧分子的顺磁性，促进了体系间跨越，使得激发单重态的荧光分子转变至三重态； 　　④当荧光物质浓度过大时,会产生自猝灭现象 * 测量荧光寿命的方法主要有两种，即时域法和频域法。频域法是用强度按正弦规律调制的激光激发样品，荧光强度也是按正弦调制的，且二者调制频率相同，通过测量荧光相对于激发光的相位差及解调系数来计算荧光寿命值。时域法也叫脉冲法，它是用高重复频率超短光脉冲激发样品，处于激发态的荧光分子在退激发到基态的过程中发射荧光释放能量，激发态荧光团荧光强度的衰减可表达为单指数函数 * 频域法的优点是对于不同的样品可选择不同的调制频率（一般为荧光寿命的倒数），从而可扩大荧光寿命的测量范围；对于荧光寿命很短