HPLC法测定噻康唑的含量和有关物质论文.docVIP

　　HPLC法测定噻康唑的含量和有关物质论文 【摘要】 目的 采用高效液相色谱法测定噻康唑的含量及有关物质。方法 采用ODS C18色谱柱：Spherisob C18(4.6mm×250mm，5μm)；保护柱(4mm×10cm)，以［甲醇∶乙腈(70∶30)］∶0.05mol/L含有0.025mol/L 1硫辛酸的磷酸三乙胺缓冲液(58∶42，V/V)为流动相(用磷酸调pH至4.0)，流速1.5ml/min，紫外检测波长260nm。结果 HPLC法测定的线性范围为0.12～0.28mg/ml，r=0.9994，最低检测限为20ng；样品溶液在24h内稳定.freelination of the content and the related substances of tioconazole by HPLC ABSTRACT Objective To determine the content and the related substances of tioconazole by HPLC. Method The column:ODS C18 column (Spherisob C18 (4.6mm×250mm, 5μm); protect column (4mm×10cm); the mobile phase: ［methanol∶acetonitrile (70∶30)］ triethyamine phosphate buffer (0.05mol/L) containing 1octanesulphonic acid (0.025mol/L) and adjusted to pH4 l/min; the content of tioconazole and its related substances under the same condition. Results The liner detection range of the determination by HPLC is 0.12～0.28 mg/ml; the correlation coeffient is 0.9994; the detection limit is 20ng; the sample solution is stable ethod is facile and accurate to determine the content and related substances of tioconazole. KEY ilipore水纯化系统所制。 2 色谱条件 色谱柱：(Spherisob C18(4.6mm×250mm，5μm)；保护柱(4mm×10cm)；流动相：［甲醇∶乙腈(70∶30)］∶0.05mol/L含有0.025mol/L 1硫辛酸的磷酸三乙胺缓冲液(58∶42，V/V)(用磷酸调pH至4.0)；柱温40℃；流速1.5ml/min；检测波长260nm；进样体积20μl。 3 测定方法 3.1 含量测定 对照品溶液 取噻康唑对照品适量，精密称定，加甲醇溶解并稀释成每ml中含0.2mg的溶液。 供试品溶液 取本品约100mg，精密称定，置100ml容量瓶中，加甲醇溶解，并稀释至刻度，混匀。取10ml此溶液置50ml容量瓶中，用甲醇稀释至刻度。 3.2 有关物质测定 对照品溶液 杂质A、B、C、D各取1mg精密称定，置25ml容量瓶中，加甲醇15ml，溶解后加至刻度。 供试品溶液 取本品100mg，置25ml容量瓶中，加15ml甲醇，振摇使溶解，再加甲醇至刻度。 4 结果与讨论 4.1 方法的专属性 通过对噻康唑主产物、溶剂、合成中间体及降解产物进行HPLC分离检测，结果表明采用HPLC法测定噻康唑的含量及有关物质的方法专属性良好(图1)。 采用USP28NF23该品种有关物质检查方法，杂质B、C分离度不佳，未达到相关要求(图2)。 4.2 系统适用性试验 取本品20mg，置100ml容量瓶中，加甲醇至刻度，制备成供试品溶液，进样20μl，记录色谱图，计算可得噻康唑的理论塔板数为2236，噻康唑峰与杂质分离度为2.4。 4.3 标准曲线的建立 精密称取噻康唑对照品100mg，置100ml容量瓶中，加甲醇使溶解并稀释至刻度，摇匀。精密量取6.0、8.0、10.0、12.0和14.0ml分别置于50ml容量瓶中，用甲醇定容。取上述溶液在选定的色谱条件下，进样20μl，记录色谱图，根据峰面积计算，以3次测定的峰面积平均值做线性回归，得回归方程为： A=7×107C+193858 r=0.9994 表明在0.12～0.28mg/ml的范围内峰面积与测定浓度呈良好的线性关系。 4.4