Smac 和Livin在肾细胞癌组织中表达及意义论文.docVIP

　　Smac 和Livin在肾细胞癌组织中表达及意义论文 王浦 刘勇 王世平 马炎 【摘要】 目的 探讨Smac和Livin在肾细胞癌（肾癌） 组织中的表达及两者在肾癌细胞凋亡中的作用和关系。方法 应用半定量RT-PCR技术检测49例肾癌组织和20例正常肾组织Smac和Livin mRNA表达，酶联免疫吸附试验（ELISA）检测Smac和Livin蛋白表达情况。结果 Smac mRNA及其蛋白在肾癌组织中的表达显著低于正常肾组织（χ2=5.929、6.538，P 0.05），Livin mRNA及其蛋白在肾癌组织中的表达显著高于正常肾组织（χ2=27.600、23.351，P 0.05），且两者均与肾癌临床病理参数有关。在肾癌组织中，Smac和Livin表达强度之间呈负相关（r=-0.39,P 0.05）。结论 Smac在肾癌组织中低表达，其表达与Livin呈明显的负相关.freelac;Livin;细胞凋亡 ［ABSTRACT］Objective［ To investigate the expressions of Smac and Livin and their association a （RCC）. Methods The expressions of Livin and Smac mRNA erase chain reaction （RT-PCR） and ELISA for tissues of 49 RCC and 20 normal kidneys. Results Expressions of Smac mRNA and protein in RCC tissue al renal tissue （χ2=5.929，6.538;P 0.05）, RNA and protein in RCC tissue al one （χ2=27.600,23.351;P 0.05）. Both Smac and Livin expressions eters of clinical pathology. A negative correlation ac and Livin in RCC （r=-0.39,P 0.05）. Conclusion Smac expression portant link in the apoptosis signal transduction a, renal cell; Smac; Livin; Apoptosis 细胞凋亡是机体维持内环境稳定的重要机制之一，如果细胞凋亡受抑，细胞死亡率下降，将导致细胞数目不断增加，表现出生长优势，这是肿瘤形成的一个重要基础。细胞凋亡是基因表达的结果，受促凋亡基因和抑凋亡基因的调控［1］。许多与凋亡和增殖有关的基因如p53、Fas/FasL、Smac、Bcl-2、IAP等都与肾细胞癌（简称肾癌）的发生发展有关，Smac和Cyt-C是一起由线粒体释放到细胞质的重要的凋亡调节子,Smac存在于哺乳动物细胞中，能直接与凋亡抑制蛋白（IAP）结合，使其丧失抑制Caspase 活性的作用，因此Smac 在细胞凋亡的途径中有着极其重要的作用［2］。Livin 属于IAP 家族新成员,是具有抑制细胞凋亡和调节细胞分裂的双功能蛋白。本研究旨在探讨Smac和Livin在肾癌组织和正常肾组织中的表达及两者的关系。 1 材料与方法 1.1 材料 1.1.1 标本 2007年10月～2008年3月，收集青岛大学医学院附属医院泌尿外科手术切除的肾癌标本49例, 男30例, 女19例，年龄29～82岁，平均42.7岁。均经病理学检查证实为肾透明细胞癌，其中高分化12例，中分化26例，低（未）分化11例；Ⅰ期21例，Ⅱ期13例, Ⅲ期10例，Ⅳ期5例。正常肾组织20例，取自肾结石或重度肾积水病人并经病理学证实，其中男12例，女8例，年龄34～67岁，平均52.0岁。所有病人术前均未行放疗、化疗或介入栓塞治疗。术后立即切取标本，用无菌生理盐水冲净血液后迅速置于液氮中，后转移至-70 ℃冰箱保存备用。 1.1.2 主要试剂 RNA提取液Trizol、PrimeScript RT-PCR试剂盒均购自大连宝生物工程有限公司，ELISA试剂盒购自美国Invitrogen公司。 1.2 方法 1.2.1 RT-PCR检测Smac和Livin基因mRNA表达 ①Smac、Livin基因以及内参GAPDH RNA引物：均由上海生物工程公司合成，其序列及扩增片段见表1。②总RNA的提取：按Trizol试剂说明书提取总RNA。琼脂糖变性凝胶电泳检测RNA的完整性，紫外线分光光度计测定吸光度值以确定RNA浓度和纯度。③cDNA合成：取总RNA 1 μg，dNT