两种CpG ODN佐剂对小鼠白血病局灶瘤的抗瘤作用研究论文.docVIP

　　两种CpG ODN佐剂对小鼠白血病局灶瘤的抗瘤作用研究论文 何爱丽,陈 虹,张王刚,曹星梅,赵万红 【摘要】 为了比较免疫佐剂CpG ODN1826和CpG ODN2006在白血病局灶肿瘤动物模型中的抗瘤作用和毒副作用，筛选合适的免疫佐剂，建立了急性淋巴细胞白血病局灶肿瘤动物模型，在不同时间用灭活的L1210细胞和不同免疫佐剂给DBA/2小鼠皮下注射，观察小鼠一般状况、成瘤率、瘤块生长情况，了解瘤块病理情况。结果表明：灭活细胞加CpG ODN1826瘤苗可以降低小鼠成瘤率，成瘤小鼠的瘤块生长缓慢，瘤块内部肿瘤细胞坏死明显.freelor Effect of Tic Tumor in Mouse Models Abstract To investigate the antitumor and side effect of CpG ODN 1826 and CpG ODN2006 as an adjuvants on leukemic tumor in mousemodels, an acute lymphocytic leukemic tumor in mouse model odel mouse at different times. The activities of mice, the tumor formation rate and the groic tumor or ined by pathologic section. The results shoic tumor formation rate, sloic tumor mass in mice and obviously cause necrosis of tumor cells, but it could not prolong the life spans of the tumorburden mice; or formation rate, sloor mass in mice and result in obvious necrosis of tumor cells, but also could eliminate the existing tumor mass in mice, and prolong the life spans of the tumorburden mice. It is concluded that using CpG ODN2006 as an adjuvant enhances the antitumor effect against the leukemic tumor,.freelorburden mice ia; tumor vaccine; cytidinephosphatteguanonine oligodeoxynucleotides 白血病的免疫治疗，长期以来一直受到人们的重视。随着生物科学技术的发展，肿瘤疫苗已经从早期的单纯灭活肿瘤细胞疫苗到今天的利用生物工程建立基因修饰肿瘤疫苗等多种形式。我科曾经应用白血病瘤苗，主动免疫治疗白血病患者，取得了良好疗效［1］，但大多患者注射局部红肿硬结，疼痛，很难坚持治疗，这提示我们寻找作用效果更好、副作用更小的免疫佐剂。我们通过白血病局灶肿瘤动物模型观察免疫佐剂CpG ODN1826和CpG ODN2006的抗白血病局灶肿瘤作用和毒副反应，为临床治疗提供实验依据。 材料和方法 动物及肿瘤细胞 DBA/2小鼠，雌雄各半共38只，体重22-28克，购自第四军医大学动物中心，为二级清洁动物。小鼠白血病细胞株L1210由西安交通大学生命科学院惠赠。 两种CpG ODN佐剂对小鼠白血病局灶瘤的抗瘤作用研究 主要试剂 GpG ODN1826 TCCATGACGTCCCTGACGTT全硫逐磷酸骨架，CpG ODN2006 TCGTCGTTTCGTTTT GTCGTT全硫逐磷酸骨架，为Coley公司产品；丝裂霉素C购于上海金康制药公司。 小鼠白血病模型的制备 取对数生长期的L1210细胞，用PBS洗3遍，调整浓度至1×105/ml，于每只小鼠右肋下皮肤分别注射0.1 ml（即5×104个肿瘤细胞），5-7天后可触及皮下结节。 小鼠肿瘤疫苗的制备 收获处于对数期生长的L1210细胞，800 rpm离心8分钟，加入丝裂霉素C（终浓度为100 μg/ml），于37℃水浴中放置30分钟，用PSB液洗涤3遍后，调整细胞浓度至2×107/ml，作瘤苗备用；将CpG ODN1826和CpG ODN2006 用PBS液分别溶解后，调整浓度至500 μg/ml，备用。 实验分组 将小鼠随机分为4组（每组小鼠雌雄各半），每组9-10只小鼠：①CpG ODN182