【2017年整理】四与Fluorometry.pptVIP

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2017-06-11 发布于浙江
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【2017年整理】四与Fluorometry.ppt

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【2017年整理】四与Fluorometry

* * * * 第四章荧光分析法 (Fluorometry) Evaluation only. Created with Aspose.Slides for .NET 3.5 Client Profile 5.2.0.0. Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd. 一、分子发光的类型分子发光分子荧光(molecular fluorescence) 分子磷光(molecular phosphorescence) 化学发光(chemiluminescence) 生物发光(bioluminescence) Evaluation only. Created with Aspose.Slides for .NET 3.5 Client Profile 5.2.0.0. Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd. Evaluation only. Created with Aspose.Slides for .NET 3.5 Client Profile 5.2.0.0. Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd. Evaluation only. Created with Aspose.Slides for .NET 3.5 Client Profile 5.2.0.0. Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd. Evaluation only. Created with Aspose.Slides for .NET 3.5 Client Profile 5.2.0.0. Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd. 二、基本原理 1.荧光、磷光的产生及去活化过程 A、基态?2 B、激发单线态??* C、激发三线态??* 能量 ?* ? ? ? ?* ?* A B C 单线态和三线态的电子分布 Evaluation only. Created with Aspose.Slides for .NET 3.5 Client Profile 5.2.0.0. Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd. 荧光、磷光能级图 S0 S1 S2 T1 F P 振动驰豫内转换系间跨越 F P 辐射无辐射振动驰豫内转换外转换系间跨越 Evaluation only. Created with Aspose.Slides for .NET 3.5 Client Profile 5.2.0.0. Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd. 2. 激发光谱和发射光谱荧光物质分子都具有两个特征光谱：激发光谱(excitation spectrum) 发射光谱(fluorescence spectrum) 激发光谱：指不同激发波长的辐射引起物质发射某一波长的相对效率。F ~?ex 荧光光谱：表示在所发射的荧光中各种波长组分的相对强度. F ~?fl Evaluation only. Created with Aspose.Slides for .NET 3.5 Client Profile 5.2.0.0. Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd. b.激发光谱和荧光光谱的用途定量分析：在作定量分析时，激发波长和荧光波长应选在最大发射强度所对应的激发波长和荧光波长处，分别称为最大激发波长和最大荧光波长。定性分析：在一定条件下，每一种荧光物质都有两个特征的光谱——激发光谱和荧光光谱； Evaluation only. Created with Aspose.Slides for .NET 3.5 Client Profile 5.2.0.0. Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd. c. 光谱特征 1）Stokes shift E=h/? E ? 最大荧光波长最大激发波长 2）荧光光谱和激发光谱大致成镜像对称荧光光谱激发光谱 S0振动能级 S1*振动能级 Evaluation only. Created with Aspose.Slides for .NET 3.5 Client Profile 5.2.0.0. Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd. 300 400 500 nm F 硫酸奎宁的激发光（红）谱和荧光光谱（蓝） 3）. 荧光光谱的形