微生物综训实验报告.docVIP

实验一、水中菌落总数测定 1 菌落总数测定的目的和意义 食品微生物检验方法为食品监测必不可少的重要组成部分。 (1)它是衡量食品卫生质量的重要指标之一，也是判定被检食品能否食用的科学依据之一。 (2)通过食品微生物检验，可以判断食品加工环境及食品卫生环境，能够对食品被细菌污染的程度做出正确的评价，为各项卫生管理工作提供科学依据，提供传染病和人类、动物和食物中毒的防治措施。 (3)食品微生物检验是以贯彻“预防为主”的卫生方针，可以有效地防止或者减少食物中毒人畜共患病的发生，保障人民的身体健康；同时，它对提高产品质量，避免经济损失，保证出口等方面具有政治上和经济上的重要意义。 菌落总数：食品检样经过处理，在一定条件下（如培养基、培养温度和培养时间等）培养后，所得每g（ml）检样中形成的微生物菌落总数。 菌落总数是指在被检样品的单位重量(g)、容积(m1)或表面积(c)内，所含能于某种周体培养基上，在一定条件下培养后所生成的细菌集落的总数。 菌落总数主要是作为判定食品被细菌污染程度的标记，也可以应用这一方法观察食一中细菌的性质以及细菌在食品中繁殖的动态以便对被检样品进行卫生学评价时提供科学依据． 落总数测定的几项说明 菌落总数的测定。是以检样中的细菌细胞和营养琼脂混合后，每个细菌细胞都能形成一个可见的单独菌落的假定为基础的。由于检验中采用37于有氧条件下培养(空气中含氧约20％)，因而并不能测出每g或ml检样中实际的总活菌数，厌氧菌、微嗜氧菌和冷营菌在此条件下不生长，有特殊营养要求的一些细菌也受到了限制，因此所得结果，只包括一群能在普通营养琼脂中发育、嗜中温的、需氧和兼性厌氧的细菌菌落的总数。鉴于食品检样中的细菌细胞是以单个，成双、链状、葡萄状或成堆的形式存在，因而在营养琼脂平板上出现的菌落可以来源于细胞块，也可以来源于单个细胞，因此平板上所得需氧和兼性厌氧菌菌落的数字不应报告活菌数，而应以单位重量、容量或表面积内的菌落数或菌落形成单位数(colony forming units，CFU)报告之。 每种细菌都有它一定的生理特性，培养时，应用不同的营养条件及其他生理条件(如温度、培养时间、PH、需氧性质等)去满足其要求，才能分别将各种细菌都培养出来。因此，要得到较全面的细菌菌落总数，应将检样接种到几种不同的非选择性培养基上，并培养在不同条件下，如温度，氧气供应等。但国家颁发的食品卫生标准对不同食品的菌落总数的规定，都是根据用普通营养琼脂进行需氧培养所得的结果确定的，因此在食品的一般卫生学评价中并不要用几种不同的非选择性培养基培养。 6.3.2 其中一个平板有较大片状菌落生长时，则不宜采用，而以无片状菌落生长的平板作为该稀释度的菌落数。若片状菌落不到平板的一般，而其余一半中菌落分布又很均匀，即可计算半个平板后乘以2，代表一个平板菌落数。 6.3.3 当平板上出现菌落间无明显界限的链状生长时，则将每条单链作为一个菌落计数。 7 结果与报告 7.1.2 若两个连续稀释度的平板菌落数在适宜计数范围内，按下式计算。 式中： N——水样中菌落数； ——平板（含适宜范围菌落数的平板）菌落数之和； n1——第一稀释度（低稀释倍数）平板个数； n2——第二稀释度（高稀释度）平板个数； d——稀释因子（第一稀释度）。 7.2 菌落总数的报告 7.2.1 菌落数小于100CFU时，按“四舍五入”原则修约，以整数报告。 7.2.2 菌落数大于或等于100CFU时，第3位数字采用“四舍五入”原则修约后，取前2位数字，后面用0代替位数；也可用10的指数形式来表示，按“四舍五入”原则修约后，采用两位有效数字。 7.2.3 若所有平板上为蔓延菌落而无法计数，则报告菌落蔓延。 7.2.4 若空白对照上有菌落生长，则此次检验结果无效。 7.2.5 以CFU/ml为单位报告。 稀释度 接种量 平板菌落计数 平均数 对照 结果/[cfu(ml)] 1 1ml 多不可计 多不可计 对照起来稀释到0.1的倍数的比较适宜平均值为64 N=127/（0.1+0.1*0.01）1 的N为1280 上述得菌落总数为1280 1ml 多不可计 10 1ml 59 64 1ml 68 10 1ml 16 15 空白没有 1mL 14 空白 0ml 0 实验二、水中大肠菌群计数——大肠菌群MPN计数法 1 实验目的　　了解和学习水中大肠菌群的测定原理和测定意义。　　学习和掌握水中大肠菌群的检测方法。　　实验原理　　水是微生物广泛分布的天然环境。各种天然水中等含有一定数量的微生物。水中微生物的主要来历有：水中的水素性微生物(如光合藻类)、来自土壤径流、降雨的外来菌群和来自下水道的污染物和人畜的排泄物等。水中的病原菌主要来历于人