三种食用菌多糖提取分离及降血糖和抗氧化作用的研究.pdf

摘要 摘 要 食用菌丰富的营养价值，较高的多糖等生物活性物质含量决定了它具有多种保 健作用，特别是抗氧化、降血糖作用。金顶侧耳（Pleurotus citrinopileatus Sing ）、 姬菇(Pleurotus cornucopiae)和毛头鬼伞(Coprinus comatus)都是近年来具有开发和推 广价值的珍稀优质食用菌，他们营养丰富，具有多种保健及药用价值。 本文对金顶侧耳、姬菇和毛头鬼伞子实体多糖采取热水提取法得到粗多糖，粗 多糖经脱蛋白、透析等步骤后得到精多糖。粗多糖得率在 31~38%间，多糖含量在 20~51% 间；精多糖得率在 15~19%间，多糖含量在 48~75% 间。金顶侧耳、姬菇精 多糖经 Sepharose4B 分离，分别得到一个大分子多糖组分Ⅰ（得率为2.49%和 6.53% ） 和一个小分子多糖组分Ⅱ（得率为 1.36%和 2.85% ），其中金顶侧耳这两个多糖组分 有O2- 的清除活性，两种多糖组分Ⅰ的多糖含量为92%和93%，在波长260nm 和280nm 处无明显的吸收，表明两种多糖不含核酸和蛋白质；红外光谱显示它们具有多糖特 征吸收峰，属于 α-型吡喃糖苷键。用 Sephadex G-200 凝胶柱层析法测得金顶侧耳、 姬菇和毛头鬼伞多糖的平均分子量分别约为 382208、303774 和 523359 。三种食用 菌粗多糖总黄酮含量在 3.0~7.0mg/g 间，总酚含量在 2.0~5.0mg/g 间, 蛋白含量在 30~45%间，粗多糖精制后多糖含量上升 30%左右，姬菇和毛头鬼伞精多糖含量达 70% 以上。金顶侧耳、姬菇和毛头鬼伞精多糖与粗多糖相比对 O2－清除率分别提高 62.5%,58.3%和 51.5%；对 OH·清除率分别提高 33.1%,42.3%和 33.2% ；对 DPPH·清 除率分别提高 56.0%,63.5%和 60.3% 。粗多糖经精制后，多糖含量明显提高，自由 基清除能力明显提高，表明多糖是清除自由基的主要功效成分。 在分析了三种食用菌粗多糖的生物活性物质、多糖含量和清除自由基活性后， 研究了粗多糖的体内降血糖和抗氧化作用。通过小鼠腹腔注射四氧嘧啶建立动物糖 尿病模型，以金顶侧耳和姬菇粗多糖(400mg/kg)分别灌胃糖尿病小鼠 28 天，同时以 降糖灵(100mg/kg)为药物治疗组，以正常小鼠为对照组，测定了 0、6、14、21 、28 d 时空腹血糖值和28 d 时糖耐量。动物处死后，取血液测定小鼠糖化血红蛋白(GHB) 含量及血脂水平，并测定了小鼠血液和脏器的抗氧化指标。结果表明，与模型组比， 灌胃食用菌粗多糖能明显改善糖尿病“三多一少”病症，能显著降低空腹血糖值 (P0.01)和血糖曲线下面积(AUC)(P0.01)，给予两种食用菌粗多糖后血糖下降百分 率都大于 15%，并使 GHB 含量恢复到正常水平(P0.05)，还能使糖尿病小鼠胆固醇 (TC)和高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)含量恢复到正常水平。金顶侧耳和姬菇粗多糖 能够显著提高糖尿病小鼠血液超氧化物歧化酶（SOD ）、谷胱甘肽过氧化物酶 (GSH-Px)和过氧化氢酶（CAT ）活力和非酶体系抗氧化能力，抑制丙二醛（MDA ） I 摘要 形成，提高谷胱甘肽（GSH ）含量和总抗氧化能力（TAOC ）, 同时也能显著提高 小鼠肝和肾的 SOD、CAT 活性及 GSH 含量，降低 MDA 含量。 多糖是三种食用菌清除自由基的主要功效成分，且本研究已表明粗多糖具有一 定的降血糖和抗氧化功效，在此基础上将粗多糖进行提纯，进一步研究精多糖的降 血糖和抗氧化作用。 通过小鼠腹腔注射四氧嘧啶建立动物糖尿病模型，以金顶侧耳、姬菇和毛头鬼 伞精多糖(低剂量组 100mg/kg，高剂量组 400mg/kg)分别灌胃糖尿病小鼠 30 天，同 时以优降糖(100mg/kg)为药物治疗组，以正常小鼠和灌胃金顶侧耳、姬菇和毛头鬼 伞精多糖(400mg/kg)正常小鼠为对照组，测定 0、7、14、22 、30 d 时空腹血糖值和 30d 时糖耐量。动物处死后，取血液测定小鼠糖化血红蛋白(GH