动物实验技术与方法幻灯片.pptVIP

动物实验 一、小鼠 ? 用右手提起小鼠尾巴将其放在鼠笼盖或其它粗糙表面上，在小鼠向前挣扎爬行时，用左手拇指和食指捏住其双耳及颈部皮肤，将小鼠置于左手掌心、无名指和小指夹其背部皮肤和尾部，即可将小鼠完全固定。 三、豚鼠 抓取幼小的豚鼠时，可用双手捧起来；抓取较大的豚鼠时，可先用手掌抠住豚鼠的背部，抓住其肩胛上方，将右手张开，用手指抓住颈部再慢慢将其提起 1．灌胃法 是借灌胃器将药物直接灌到动物胃内的一种常用给药方法，此法给药剂量准确。但是每天强制性操作和定时给药会给动物造成一定程度的机械性损伤和心理上的影响。因此必须充分掌握灌胃技术。 （1）鼠类：鼠类的灌胃器由注射器和特殊的灌胃针构成。左手固定鼠，右手持灌胃器，将灌胃针从鼠的右口角插入口中，沿咽后壁慢慢插入食道，使其前端到达膈肌位置。灌胃针插入时应无阻力，如有阻力或动物挣扎则应退针或将针拔出，以免损伤、穿破食道或误入气管。 缓慢注射，皮肤表面出现白色桔皮样隆起，若隆起可维持一定时间，则证明确实注射在皮内.如很快消失,就可能注入皮下,应重换部位再注射,如果注射完毕后马上拔针,药液会从针孔漏出,所以需注射后5min再拔出. 小鼠的一次注射剂量为0.1-0.2ml/10g(体重) 大鼠一次注射剂量为1-2ml/100g(体重). 家兔：下腹部近腹白线左右两侧1cm处 犬：脐后腹白线两侧边1—2cm处进行腹腔注射 麻醉方法 1．吸入法 乙醚、氯仿等挥发性麻醉剂用吸入法麻醉，适用于各种实验动物。大鼠、小鼠可将头部放入蘸有乙醚棉球的广口瓶或干燥器内，4—6分钟后即处于麻醉状态。如实验过程较长，可在其鼻部放棉花或纱布，不时滴加乙醚维持，也可用乙醚先麻醉后再用非挥发性麻醉剂维持麻醉。 施行浸润麻醉时，用皮试针头先皮内注射，然后换局麻长针头，由皮点进针，放射到皮点四周，继续注射，直至要求麻醉区域的皮肤都被浸润为止。根据实验操作要求的深度，可按皮下、筋膜、肌肉、腹膜或骨膜的顺序，依次分别注入麻药，以达到浸润神经未梢的目的。每次注药前，应回抽，以防药液误注于血管内。 麻醉注意事项 所有麻醉药使用过量均可引起中毒，应特别注意各种麻醉药的剂量和用药途径。 注射时，一般要求缓慢，并随时观察动物的肌肉紧张性、角膜反射、去痛反射等指标。 动物麻醉后体温下降，要注意保暖。 万一麻醉过量，应根据不同情况，积极采取措施，如给予苏醒剂，或注射强心剂。 废弃物及尸体的无害化处理 一、组织管理 在各单位实验动物管理委员会的指导下，所属的动物实验中心（或室）对废物的无害化实行专人领导和专人负责制，并制定相应的规章制度强化动物实验中的废弃物的无害化处理的管理。 大白鼠后眼眶静脉丛取血方法 （3）股动脉采血：大量取血时常用此法。需手术分离股动脉。小鼠的一次采血量可达0.5ml，大鼠可达2.0ml。 （4）断头采血 （5）心脏采血 狗股动脉取血方法 猕猴后肢静脉取血方法 小白鼠断头取血方法 大白鼠颈静脉取血方法 兔耳缘静脉取血方法 狗颈静脉取血方法 （6）心脏采血：将动物麻醉并仰卧固定置实验台上。心前区皮肤脱毛，常规消毒。于左侧第3、4肋间心尖博动最强处将针头垂直刺入心脏，由于心脏的搏动，血液可自动进入注射器。如无血液流出，拔出针头后重新穿刺，不能左右来回斜穿，以免造成气胸而导致动物很快死亡。经6—7天后可重复穿刺采血。 （二）尿液采集 1.大、小鼠：代谢笼 2.兔、犬：导尿管 （三）脑脊液采集 （四）胸腔积液 （五）腹腔液 （六）其他：胃液、胆汁、关节液 消化液采集 (一)胃液的采集 通过刺激，使胃液分泌增加，再用插胃管的办法抽取胃液。 (二)胆汁的采集 采集胆汁需要施行手术。 (三)胰液的采集 胰液的采集基本同胆汁的采集。 尿液采集 (一)代谢笼 动物排便时，可通过笼子底部的大小便分离漏斗，将尿液与粪便分开，达到采集尿液的目的。 (二)压迫膀胱(强制排尿) 将动物固定，按压骶骨两侧的腰背部或轻 轻压迫膀胱的体表部位，使其排尿。 目的：防止动物挣扎，保持安静 防止意外损伤，便于操作 实验动物的麻醉 全身麻醉 1%硫喷妥钠:15mg/kg，iv/ip 2%戊巴比妥:40mg/kg，iv/ip 盐酸氯胺酮:40mg/kg，sc/im 复方氯胺酮:0.01ml/kg，sc/im 速眠新(846)注射液 每Kg体重: 杂种犬：0.1---0.15ml 纯种犬：0.04—0.08ml 猫、兔：0.2—0.3ml 羊、猴：0.1—0.15ml 鼠 ：0.3—0.8ml 在给药过程中，如果发现动物的角膜反射消失，瞳孔突然放大，应立即停止麻醉。如果呼吸停止，可进行人工呼吸，并配以咖