中国对虾细胞色素P450基因CYP4原核表达条件优化剖析.PDFVIP

P450 CYP4 1,2 1 1,3 1,4 喆 , , , (1. , 266071; 2. , 510300; 3. , 200090; 4. , 116023) 摘要: 根据克隆得到的中国对虾(Fenneropenaeus chinensis)CYP4 基因开放阅读框设计引物, 构建了中 国对虾 CYP4 基因原核表达载体 p28a - CYP4, 并对重组菌株 Rosetta/28a-CYP4 的原核表达条件进行了 优化。结果表明: p28a-CYP4 转化 Rosetta 后可实现 CYP4 基因的原核表达, SDS分析显示其在 56.0 kDa 处有显著诱导条带; 通过对诱导温度、IPTG 浓度、诱导时机(OD600)及诱导时间的优化表明, 重组 菌株 Rosetta/p28a-CYP4 的最佳诱导温度为 37 ℃,