高级生化题库——第四章酶.docVIP

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酶 名词解释 1、固定化酶 是非题 1、酶的最适pH与酶的等电点是两个不同的概念,但两者之间有相关性,两个数值通常比较接近或相同。 (-) 2、对于一个酶而言,其过渡态的底物类似物与底物的物相比较,是更有效的竞争性抑制剂。 (+) 3、在结构上与底物无关的各种代谢物有可能改变酶的Km值o 4、如果加入足够的底物,即使存在非竞争性抑制剂,酶催化反应也能达到正常的Vmax。 5.、酶反应最适H不仅取决于酶分子的解离情况,同时也取决于底物分子的解离情况( )反竞争性抑制剂(I)首先与酶结合形成EI,EI再与底物(S)结合形成EIS,EIS不能分解成产物,I因此而起抑制作用。 9、一种酶有几种底物时,就有几种Km值。 10、别构酶对温度的反应很特殊,有的在0℃时不稳定,在室温时反而稳定。 填空题 1、酶容易失活,如何保存酶制品是一个很重要的问题。通常酶制品的保存方法有___和___等。 2、有一类不可逆抑制剂具有被酶激活的性质,被称为_________型不可逆抑制剂,又可被称作酶的_____________胰蛋白酶原端切去6肽后变成有活性的胰蛋白酶。 于1953年首先完成了胰岛素的全部化学结构的测定工作。而牛胰核糖核酸酶是测出一级结构的第一个酶分子,由一条含124个残基的多肽链组成,分子内含有个二硫键。 胰凝乳蛋白酶原受到胰蛋白酶作用后,在与之间的肽键断开,成为有活性的π-胰凝乳蛋白酶,再失去两个二肽和而形成酶的稳定形式α-胰凝乳蛋白酶。 底物引进一个基团以后,引起酶与底物结合能增加,此时酶催化反应速度增大,是由于______ A. 结合能增大 B. 增加的结合能被用来降低反应活化能 C. 增加的结合能被用来降低Km D. 增加的结合能被用来增大Km下列几种酶中,哪一个酶需要金属离子作为辅基a.羧肽酶? b.核糖核酸酶? c.溶菌酶? d.胰凝乳蛋白酶 当酶促反应速度为Vmax的80%时,其Km与[S]之间的关系如下列情况中的哪一种?a.Km=0.5[S]?? b.Km=0.25[S]?? c.Km=0.75[S]??? d.Km=[S] 8、.胰凝乳蛋白酶的活性中心中构成一个电荷中继网的三个氨基酸残基是:()    (1)HIS,Arg,Glu  (2)Ser,Lys,Asp  (4)Ser,Arg,Glu 9、MWC模型和KNF模型的一个区别是:()   (1) MWC模型可以解释正协同性,而KNF模型不能 (2) MWC模型可以解释负协同性,而KNF模型不能 (3) MWC模型不能解释正协同性,而KNF模型能  (4) MWC模型不能解释负协同性,而KNF模型能 10、汞对酶的抑制作用,可用下列哪个方法解除? A. 加大底物浓度 B. 透析(对PH7.4磷酸缓冲液) C. 解磷定 D. 二巯基丙醇 11、胰凝乳蛋白酶催化肽链水解时,主要通过下列哪个机制,从而使酶反应速度加快? A. 诱导契合 B. 底物形变 C. 邻近效应,轨道定向 D. 广义酸碱催化,形成共价中间物 12、对于别构酶而言,在一定底物浓度范围内,[S]的变化如不足以影响酶反应速度,则该酶具: A. 正协同作用 B. 负协同作用 C. 同促效应 D. 异促效应 13、一种单亚基的酶处于人体某一代谢途径的中间,在病人中发现,突变造成了对于酶唯一底物的km值变为原来的两倍,要保持此途径的代谢速率,底物浓度应怎样变化: A、正好两倍 B、正好一半 C、大于两倍 D、小于一半 简答题 酶分离纯化的动力学? 酶提纯的目的,不仅要求酶量得率高,而且要求得到不含或少含其它杂蛋白,使酶的纯度提高。因此,在酶的纯化过程中,除了测定体积或一定重量酶制剂中含有的酶活力单位数之外,还要测定酶制剂中蛋白(或蛋白氮)的含量,以求得酶的纯度。酶的纯度用比活力表示。 比活力=活力单位数/毫克蛋白=总活力单位数/总蛋白(氮)毫克数。此外在酶的纯化工作中还要计算两个具有实际意义的项目:即纯化倍数和产量%, 纯化倍数=每次比活力/第一次比活力 产量%=每次总活力/第一次总活力×100% 以下为从粘质赛氏菌粗提提纯液提纯Asn酶的过程,经7步,分别测总活力单位,总蛋白量的数据,从这些数据中进一步计算出活力、产量%和纯化倍数。 纯化步骤 总蛋白(g) 总活力单位 比活力单位/mgPr 纯化倍数 产量% 1.粗抽提液 30 21000 0.7 1 100 2.氯化锰 酸,热度水 Pr(55℃,5分钟) 7.64 15017 2.0 2.8 72 3.KOH冰冻融解 5.58 14872 2.7 3.8 71 4.DEAE-纤维素吸附层吸 0.113 5025 44.5 63.5 24 5

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