花粉管通道法在植物转基因中的研究与应用.pdfVIP

第35卷第6期 东 北 农 业 大 学 学 报 35(6):764-768 2004年 12月 JournalofNortheastAgriculturalUniversity December2004 文章编号 1005-9369(2004)06-0764-05 花粉管通道法在植物转基因中的研究与应用 王永锋，架雨时’，高晓蓉 (大连理工大学生物工程系，辽宁 大连 116024) 摘 要:花粉管通道法是植物遗传转化的方法之一，它具有易于操作，适用范围广，育种时间短，有利于单 子叶植物转化等特点。文章综述了该方法在水稻、小麦、玉米、大豆、棉花、烟草以及番茄等重要农作物中的应 用情况和研究进展。 关键词:花粉管通道法;植物;转基因;育种 中图分类号:Q943.2;S330 文献标识码:A 植物转基因方法很多，如基因枪法、农杆菌介 1花粉管通道法转基因的研究 导法、PEG法、超声波法、硅化纤维法、脂质体介 导法、激光转化法、花粉管通道法等。其中应用较 花粉管通道法最初的萌芽是1975年Pandey对 广泛的为农杆菌介导法和基因枪法，而花粉管通道 烟草的研究。试验将供体花粉用Y射线杀死后与受 法因其独具匠心的优势，也被众多研究人员采用， 体新鲜花粉混合授粉得到转化结果，认为可不通过 在植物遗传育种领域取得了可喜的成果。 配子融合而发生基因转化。1980年，Hess等报道 植物在双受精完成后，受精卵细胞的初次分 了利用吸收外源DNA的花粉转基因得到花色变异 裂需要充分的物质和能量积累。此时期的细胞尚 的矮牵牛。我国科学家周光宇3[[1在深入分析远缘杂 不具备完整的细胞壁和核膜系统，细胞内外的物 交成功经验的基础上，对远缘杂交所产生的染色体 质交流频繁，通过花粉通道渗透进人胚囊的外源 水平以下的杂交现象提出了DNA片段杂交假设。 DNA片段有可能进人受精卵细胞，并进一步通过 研究认为在植物种分子进化的过程中，部分基因序 尚不明确的机制被整合到受体植物基因组中。近 列存在同源性，当远缘植物基因组进人受体后，除 年来亚显微结构的观察揭示，在精子进人时卵细 大部分被酶解外，存留的某些小片段有可能通过冈 胞的细胞壁还未形成，一些胞壁物质分散地聚集 崎片段的方式被整合到受体植物基因组中，在发生 在细胞膜的表面[I.21。这时的卵细胞类似未完全酶 性状变异的同时，保持了染色体细胞水平上的稳定 解的原生质体，为外源基因的进人提供了可能性。 性。在此理论基础上，1981年首次利用花粉管通 通过对棉花的观察表明，胚珠在受精之前，珠心 道法，成功地将外源海岛棉DNA导人陆地棉，培 是一个封闭的体系。在花粉管穿过花柱转导组织 育出抗枯萎病的栽培品种[41。随后许多科学家在不 到达胚珠前后，从珠孔到胚囊的一些珠心细胞退 同的植物上进行了大量研究，建立了小麦、水稻、 化形成一条便于花粉管生长的通道。利用这条花 大豆、玉米、烟草、棉花以及番茄等重要农作物通 粉管通道，使外源DNA进入胚囊，转化受精卵或 过该方法转移外源基因的方法，并取得了一些重要 卵细胞和早期胚胎细胞，从而获得具有遗传变异 成果。现将它们归纳整理如下。 的转化植株，达到遗传转化的目的。 1.1 待转基因种类 前期以导人近缘种的总DNA为主，以后逐渐 收稿日期:2003-12-08