血栓与止血的筛选试验及其临床应用-培训课件.ppt

2.血小板功能分析仪（platelet function analyzer-100,PFA-100) 体外筛选血小板黏附和聚集的仪器。以标有胶原/腺上腺素（CEPI）和胶原/ADP（CADP）两种纤维膜为诱导剂，以观察膜孔闭合时间（closure time，CT）为结果。 参考范围 CEPI为61～203s；CADP：48 ～187s In Vivo Haemostasis PFA100.avi capillary 200μm aperture 150μm epinephrine or ADP platelet vWF erythrocyte FLOW - 40 mbar collagen membrane PFA-100? Test Principle lumen fibrinogen platelet collagen fibrils erythrocyte endothelial cell vWF 临床应用 一期止血缺陷的筛选试验。 敏感性：CEPI/CADP为82.5%/66.9% 特异性： CEPI/CADP为88.7%/85.5% 阴性预测值： CEPI/CADP为83%/75% 阳性预测值： CEPI/CADP为88%/79% vWD：CEPI/CADP的敏感性为88%/87%；特异性为95%/95%。 血小板无力症：CT延长，可替代BT，准确、可靠。 服用ASA时：CEPI的CT延长，CADP可正常；与其他疾病与药物诱导血小板功能异常鉴别的敏感性和特异性分别为100%和50%。 方法学评价 PFA-100操作简便、快速、结果准确。CEPI/CADP的变异系数为12%/8%，与PAgT有良好相关性。 受PLT↓、贫血（Hct＜30%）、O型血型、3.8%枸橼酸盐和富含核黄素食物等的影响；Fg的裂解肽可影响 Fg-vWF/GPⅡb-Ⅲa的结合 图 实验室检测的全面质量管理 注：分析测定包括：工作环境、人员素质、室间质评、室内质控、仪器设备、操作标准、试剂准备、方法选择。 结果 运送 临床 医师 分析前质量保证 标本 处理 登记发出报告 备查 检验结果 信息反馈 分析测定 分析 结果 病人准备 标本采集 标本运送 分析中质量保证 申请 检验 室内 审核 保留 标本 分析中质量保证 谢谢，请指导。 * * 7 4）PT（↑）、APTT（↑）和PLT（↓） 5）PT（N）、APTT（N）和PLT（↑） 6）有出血症状，但PT（N），APTT（N）和PLT（N） 图 3 先天性凝血异常的实验室检查 表 获得性凝血性障碍项目的选择和应用 （四）纤溶活性增强筛选试验的应用 1、原发性纤溶性增强 指组织型纤溶酶原激活物（t-PA）或尿激酶型纤溶酶原活物（u-PA）的活性增强所致纤溶性亢进 2、继发性纤溶活性增强 几乎都见于DIC，是指因子Ⅻa激活激肽释放酶原（PK）生成激肽释放酶（KK），KK激活纤溶系统所致纤溶活性增强。 3、筛选试验 纤维蛋白（原）降解产物（FDP）测定 D-二聚体测定（D-D） 图5 FDP和D-D的生成 1、纤维蛋白原（Fg）和纤维蛋白（Fb）降解产物（FDPs）测定 指纤溶酶同时降解Fg和Fb产生的FDPs。 （1）定性试验：胶乳凝集法。 阴性：血清FDP含量＜10μg/mL，血浆FDP含量＜5μg/mL，尿液FDP含量＜2μg/mL。 阳性：血清FDP含量≥10μg/mL，血浆FDP含量≥ 5μg/mL，尿液FDP含量≥ 2μg/mL。 （2）定量试验：ELISA法。包被于固相的FDP抗体与样本中FDP（抗原）结合，加入酶标抗体后形成夹心复合物，呈显色反应。 参考值：＜5 μg/mL。 2、D-二聚体（D-D）测定 指纤溶酶特异性降解纤维蛋白（Fb）所产生的降解产物。 （1）定性试验：胶乳凝集试验。 阴性：无凝集颗粒者，即D-D含量＜0.5μg/mL 阳性：有凝集颗粒者，即D-D含量≥0.5μg/mL 半定量：以＜0.5μg/mL、 ≥0.5μg/mL×阳性时的最大稀释倍数。 （2）定量试验：ELISA法。 参考范围： ＜0.5μg/mL （3）定量试验：胶体金法。将血浆加入检测卡孔内，血浆中D-D吸附于包被有D-D单抗膜中，再加入D-D单抗-胶体金耦联物溶液，膜中D-D将与金标抗体发生结合反应，用光笔阅读仪读数。 参考范围： ＜0.3 mg/L 临床应用 （1）纤溶活性增强筛检试验的应用 FDP正常，D-D正常：多数为正常人，提示无纤溶过度现象。 FDP阳性，D-D正常：多数为FDP的假阳性或原发性纤溶症。 FDP正常，D-D阳性：多数为FDP假阴性或继发性纤溶症。 FD