HE石蜡切片步骤,免疫组化步骤.docVIP

HE染色 1．取材 切取的组织块不宜太大，以固定剂穿透，通常以mm×6mm×5mm为宜。2．固定 将切好的组织用生理盐水组织洗，立即投入固定液中固定，固定3。 水分洗涤 材料经固定后,脱水 80%、90%、0%、0%各级乙醇溶液脱水各0min 注意事项： （1）脱水必须在有盖的玻璃品中进行，防止吸收气中80％的酒精×小时95％的酒精×小时100％的酒精×小时×2100％的酒精×5．透明 纯酒精、二甲苯等量混合液15min，二甲苯（至透明为止）湿气6．透蜡 放入二甲苯和石蜡各半的混合液min，再放入石蜡、石蜡透蜡分钟。 保持包埋 包埋时，用镊子夹取从温箱中取出盛放纯石蜡的蜡杯，倒入材料排列整齐切片 将已固定和修好的石蜡块装在切片机的夹物台上。 将切片刀固定在刀夹上，刀口向上。 摇动推动螺旋，使石蜡块与刀口贴近，但不可超过刀口。 调整石蜡块与刀口之间的角度与位置，刀片与石蜡切片约成15度左右。 调整厚度调节器到所需的切片厚度，一般为410微米。 一切调整好后主可以开始切片。此时右手摇动转轮，让蜡块切成蜡带，左手持毛笔将蜡带提起，摇转速度不可太急，通常以4050r/min。 切成的蜡带到2030cm长时，右手用另一支毛笔轻轻将蜡带挑起，以免卷曲，并牵引成带，平放在蜡带盒上，靠刀面的一面较光滑，朝下，较皱的一面朝上。 用单面刀片切取蜡片一小段，放在载玻上加水一滴，置于放大镜或显微镜下