1.1DNA组技术的基本工具重点讲义
DNA聚合酶 DNA连接酶 区别 相同点 寻根问底 DNA连接酶与DNA聚合酶是一回事吗?为什么? 1)只能将单个核苷酸连接到已有的DNA片段上,形成磷酸二酯键 形成磷酸二酯键 1)在两个DNA片段之间形成磷酸二酯键 外源基因(如抗虫基因)怎样才能导入受体细胞(如棉花细胞)? 导入过程需要运输工具——运载体。 (三)基因进入受体细胞的载体——“分子运输车” 运载体的作用有哪些? 作用一:作为运载工具,将外源基因(抗虫基因)转移到受体细胞(棉花细胞)中去。 作用二:利用运载体在受体细胞(棉花细胞)内,对外源基因(抗虫基因)进行大量复制。 基因工程又叫基因拼接技术或DNA重组技术。该技术是它是一种按照人们意愿,定向改造生物遗传特性的技术。在生物体外,通过对DNA分子进行人工“剪切”和“拼接”,对生物的基因进行改造和重新组合,然后导入受体细胞内进行无性繁殖,使重组基因在受体细胞内表达,产生出人类所需要的基因产物。 来源:主要是从原核生物中分离纯化出来的 4000种。 注:限制性酶是一大类酶,不是一种酶。 限制酶大多可以专一性识别双链DNA分子上的某种特定核苷酸序列, 限制酶所识别的序列,无论是奇数个碱基还是偶数个碱基,都可以找到一条中心轴线 粘质沙雷氏杆菌 基因工程 专题1 基因工程 是指按照人们的愿望,进行严格的设计,并通过体外DNA重组和转基因等技术,赋予生物以新的遗传特性,从而创造出更符合人们需要的新的生物类型和生物产品。由于基因工程是在DNA分子水平上进行设计和施工的,因此又叫做DNA重组技术。 一、基因工程的概念 基因工程的别名 操作环境 操作对象 操作水平 基本过程 主要的技术 结果 DNA重组技术 生物体外 基因 DNA分子水平 人类需要的新生物类型和产品 剪切 → 拼接 → 导入 → 表达 基因工程的原理 DNA重组技术和转基因技术 ----基础理论和技术发展催生了基因工程 科技探索之路 生物化学、分子生物学和微生物学等学科的基础上发展起来的,正是这些学科的基础理论和相关技术的发展催生了基因工程。 20世纪中叶,基础理论取得了重大突破 艾弗里:①DNA是遗传物质 ②DNA可从一种生物个体转移到另一种生物个体。 沃森、克里克提出DNA的双螺旋结构模型。 梅塞尔松、斯塔尔证明DNA的半保留复制 克里克等提出中心法则 DNA RNA 蛋白质 转录 翻译 逆转录 复制 1963年尼伦伯格和马太破译编码氨基酸的遗传密码,1966年霍拉纳用实验加以证明。 技术发明使基因工程的实施成为可能 科技探索之路 1)基因转移载体的发现 2)工具酶的发现 3)DNA合成和测序技术的发明 4) DNA体外重组的实现 5)重组DNA表达实验的成功 6)第一例转基因动物问世 7)PCR技术的发明 每100kg 猪或牛的胰腺中仅可提取4~5g。 1979年,美国将人的胰岛素基因重组到大肠杆菌内,实现了细菌生产胰岛素,大大降低了生产成本。 治疗糖尿病特效药—— 据WTO调查: 2005年全世界约有糖尿病患者1.8亿人,我国约6000万。 胰岛素 思考:转基因技术实现了一种生物的某些性状 在另一种生物中表达。这些性状的表达与我们学过的基因的什么过程有关? 密码子在生物界是 的! DNA(基因) mRNA 蛋白质(性状) 转录 翻译 通用 问题探讨: 苏云金芽孢杆菌 毒蛋白 普通棉花 抗虫棉 相关连接: 苏云金芽孢杆菌含有一种可以合成毒蛋白的基因。 让细菌的毒蛋白基因在棉花细胞中表达,可培育出抵抗棉铃虫害的抗虫棉。 想一想需要做哪些关键工作? 基因工程培育抗虫棉的关键步骤: 关键步骤一: 抗虫基因从苏云金芽孢杆菌细胞内提取出来 关键步骤二: 抗虫基因与运载体“缝合” 关键步骤三: 抗虫基因导入棉花细胞 二、DNA重组技术的基本工具 “分子手术刀”—— 限制性核酸内切酶 “分子缝合针”—— DNA连接酶 “分子运输车”—— 基因导入受体细胞的载体 解决培育抗虫棉的关键步骤需要哪些工具? (1)来源: (2)特点: (3)作用结果: (一)限制性核酸内切酶----“分子手术刀” 阅读课本4—5页,思考下列问题 主要是从原核生物中分离纯化出来的 4000种。 表现在2个方面: 一、识别双链DNA分子中特定的核苷酸序列(特异性) 大多数限制酶的识别序列由6个核甘酸组成(EcoRⅠ SmaⅠ),也有少数限制酶的识别序列由4、5或8个核甘酸组成。 无论是6个碱基还是4个碱基,都可以找到一条中心轴线(如图),中轴线两侧的双链DNA上的碱基是反向、对称
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