MagNA Pure LC - 生物通--------中国生命科学网.PDFVIP

全新 MagNA Pure LC 总核酸分离 试剂盒-High Performance Michael Kirchgesser*，Sabine Eppler ，Christel Adem，Sabine Mitzel，Werner Malmberg ，Claudia Kappelsberger，Louise Zieseniss，Peter Wenzig Roche Applied Science，Penzberg，Germany *通讯作者：michael.kirchgesser@ 前言 PCR 系统上进行分析。用 15μl 各种预混液和5μl 各种洗脱液建立扩增反应，并运行45 个周期。 现在有许多用于核酸分离的——人工和自动 ——试剂盒和方法。但是，其中很少能保证全自动 结果和讨论 的样品制备，同时保证最高回收率和灵敏度。因此 所有试剂盒组成部分都进行了优化，对不同试 罗氏诊断公司开发了全新的MagNA Pure LC 总核 剂组成进行了试验，更改了所有的处理步骤和反应 酸分离试剂盒-High Performance 。这种试剂盒基 条件以寻找最佳的总核酸（TNA ）分离程序。新方 于经典的磁珠分离技术，后者成功用于不同的 法兼容MagNA Pure LC 1.0 仪器和最新的MagNA MagNA Pure 自动核酸分离纯化系统已有多年。这 Pure LC 2.0 仪器。 个新试剂盒通过技术优化，保证了总病毒DNA 和 RNA 从血浆、血清和全血中的极高回收率，从而 灵敏度/ 阳性率 适用于高灵敏度的病毒核酸检测。此外，它使可处 实验结果显示，达到最高的灵敏度需要非常充 理的样品量范围达到 100-1000μl。并且，如果需 分的结合步骤，这就需要相对长的运行时间（32 要的话，还有外部裂解方法可供选用，从而允许在 份样品需要180 分钟）。这种“高灵敏度（总NA HS） MagNA Pure LC 仪器之外进行病毒灭活。 方法”允许对于每次分离检测低于 100 个病毒拷贝 索取试剂盒的说明书及报价！ 数（用200μl 样品量），理论上相当于每次（RT-） PCR 可检测低于10 个拷贝。这种方法在我们的灵 材料和方法 敏度试验中显示良好的结果（表 1），与当前实验 新试剂盒是用人EDTA 血浆、枸橼酸盐血浆、 室中最好的对照系统相似，甚至更好。 血清和全血作为样品材料开发的。本研究中，在样 但对于许多应用，这种最高灵敏度不是必需 品中添加不同量的 DNA 病毒（巨细胞病毒、EB 的，因此我们也开发了一种耗时较短的“高性能（总 病毒）和RNA 病毒（甲型肝炎病毒、甲型流感病 NA HP）方法”，即灵敏度稍低，但速度快得多（32 毒），并在MagNA Pure LC 仪器及对照平台上进 份样品需90 分钟）。 行处理。所有样品至少以4 倍复制进行试验。 纯 化核酸的洗脱体积为50 或 100μl。对上述4 种病 表1：新的“总NA HS”和“总NA