变性高效液相色谱检测乳制品和化妆品中绿脓杆菌的研究.pdfVIP

※分析检测 良晶科学 2009，VoL30,No．06 139 变性高效液相色谱检测乳制品和化妆品中 绿脓杆菌的研究 曹际娟1，郑秋月1,2，孙哲平1，王秋艳1，裴轶君1，赵昕1 1 1 (1．辽宁出入境检验检疫局，辽宁大连 16001；2．沈阳农业大学，辽宁沈阳10161) 摘要：目的：应用PCR结合变性高效液相色谱技术实现绿脓杆菌的快速鉴定。方法：利用所报道的绿脓杆菌外 毒素A(ETA)基因设计引物和探针，并对该方法进行特异性、灵敏度、精密度等方面的考察。结果：用该方法 未检测到绿脓杆菌的近源种及其他细菌的阳性吸收峰，检测灵敏度可达到100CFU／ml。结论：用PCR结合变性高 效液相色谱检测绿脓杆菌不仅特异性好、灵敏度高，且快速简便。 关键词：DHPLC；绿脓杆菌；外毒素A基因；检测 with ChainReactionfor DenaturingHigh-PerformanceLiquidChromatographyCoupledPolymerase Detecting Pseudomonasin andCosmeticProducts aeruginosaDairy CAO Xinl B-juanl，ZENGQiu-yuel．2，SUNZhe-pin91，WANGQiu—yanl，PEIYi-junl，ZHAO 116001，China； 1 2．ShenyangAgriculturalUniversity,Shenyang10161，cam) Pseudomonas Abstract：Objective：Torapidlyidenfffy aerltgiPlosal塔ingdenamringhigh-p,既formanceliquidchromatography with chain and for PCR (DHPLC)coupledpolymerasereaction(PCR)．Methods：Theprimersprobesspecificamplification basedonthe ofexotoxin thenthe we托designed reported type ofP．aeruginosa．and sequence A(ETA)gene and ofthismethodwere ofPseudomonasandother ofPseudomonas stability analyzed．Results：Inanalysis aer”giriosa species this callbe the is100CFU／m1．Conclusion：ThePCR-DHPLCmethod by detected,andsensitivity method,onlyP．aeruginosa is and fortheidentification rapid,specific，sensitive ofP．aeruginosa