TSG101在食管癌、胃癌及大肠癌中的表达及义论文.docVIP

　　TSG101在食管癌、胃癌及大肠癌中的表达及义论文 陈艳宇，曾子华，郑佩娥，李红，方力，郭莉，康小玲，蒋光愉 【摘要】 目的 探讨TSG101在人消化道恶性上皮性肿瘤中的表达及其意义。方法 采用免疫组化的方法检测TSG101在食管癌、胃癌及大肠癌石蜡包埋组织中的表达。结果 TSG101蛋白在25例食管癌.freelor Susceptibility Gene TSG101 in Carcinoma of Esophagus and Gastrointestinal Tract Key a；Gastric carcinoma；Colorectal carcinoma； Immunohistochemistry 肿瘤易感基因101(Tumor susceptibility gene 101,TSG101)由Li等［1］应用随机纯合子敲除技术(random homozygous knockout ，RHKO)于1996 年发现，TSG101功能失活可引起小鼠NIH 3T3成纤维细胞的恶性转化,给裸鼠皮下注射该转化细胞可形成肿瘤并发生转移；恢复TSG101功能可逆转部分细胞的恶性表型,因此它被认为是一个肿瘤抑制基因。随后, Li等［2］克隆到了人的TSG101 基因( hTSG101), 定位于染色体11p15.1-p15.2区。已有研究认为TSG101基因的表达异常可能与乳腺癌的发生有关，TSG101在人消化道恶性上皮性肿瘤发生、发展过程中的可能作用国内仅见个别报道，我们应用免疫组化的方法检测TSG101 蛋白在食管癌、胃癌及大肠癌共97例石蜡包埋标本中的表达。 1材料与方法 1.1标本来源 收集暨南大学第一附属医院（广州市华侨医院）病理科2002年～2004年，及暨南大学第四附属医院（广州市红十字会医院） 病理科2004年9月～12月经手术切除的食管癌、胃癌及大肠癌石蜡包埋标本。所有标本经病理确诊，资料完整，手术前均未行放、化疗或生物治疗。 根据中国肿瘤病理学分类［3］对所有标本进行组织学分型、分级。食管癌标本共25例：均为鳞状细胞癌，其中Ⅰ级3例，Ⅱ级12例，Ⅲ级10例。胃癌标本共32例：管状腺癌10例（其中高分化1例，中分化9例），黏液腺癌（高分化型）4例，低分化腺癌15例，未分化癌3例。大肠癌标本共40例：乳头状腺癌5例，管状腺癌30例（Ⅰ级7例，Ⅱ级15例，Ⅲ级8例），黏液腺癌5例。 1.2主要试剂与方法 免疫组化所用的TSG101一抗为Dako公司的鼠抗人单克隆抗体，即用型非生物素免疫组化试剂盒，以及DAB酶底物显色试剂盒购自福州迈新生物技术有限公司。 所有标本均经10 %中性甲醛固定，石蜡包埋，4μm连续切片，行HE常规及免疫组化染色。免疫组化染色采用二步法，TSG101抗原经高压修复，一抗工作浓度是1:100，实验步骤按照试剂盒说明书操作，以TBS代替一抗作为阴性对照。 1.3免疫组化结果判断 TSG101蛋白定位于癌细胞胞浆内，呈细或稍粗的棕黄色颗粒状。以着色强度高于背景非特异性染色者为阳性表达。每张切片随机选取5个高倍视野，首先按阳性细胞所占百分比评分：阴性为0分，阳性细胞数≤10%为1分，11%～50%为2分，51%～75%为3分， 75%为4分；再按染色强度评分：无色为0，淡黄色为1分，棕黄色为2分，棕褐色为3分；最后按二者乘积分数分为4个等级：“-”（0，1，2），“+”（3，4），“++”（6，8），“+++”（9，12）。我们将分数≥3定为阳性， 3为阴性［4］（图1，2）。 1.4统计学方法 采用SPSS10.0 统计软件处理,四格表资料的χ2 检验以及多个样本比较的秩和检验（Kruskal.上卷，第1版，北京：科学技术文献出版社，2001：59163. 4姚广裕，杨名添，戎铁华，等. MT1-MMP在乳腺癌组织中的表达及临床意义J.癌症，2004，23（11）：14821486. 5Seizinger BR, Klinger HP, Junien C, et al. Report of the mittee on chromosome and gene loss in human neoplasia J. Cytoge. Cell Ge, 1991, 58:10801096. 6 Feng GH, Lih CJ, Cohen SN. TSG101 protein steady-state level is regulated posttranslationally by an evolutionarily conserved COOHterminal sequence J. Cancer Res, 2000, 60:17361741. 7 Bent NA