《中国药典》收载附子3种加工品中生物碱的含量分级对比测定论文.docVIP

　　《中国药典》收载附子3种加工品中生物碱的含量分级对比测定论文 余葱葱，彭成，郭力，叶强 【摘要】 目的系统对比研究盐附子、黑顺片、白附片3种附子加工品的生物碱含量。方法采用常用滴定、UV、HPLC方法分别测定附子3种加工品的总生物碱，酯型生物碱，乌头碱、乌头次碱、新乌头碱等双酯型生物碱的含量。结果盐附子同黑顺片、白附片相比，总生物碱含量下降80%～85%，酯型生物碱下降70%～85%.freelal titration method,UV,HPLC ine the total alkanoid,esteralkanoid,doubleester alkanoid involved aconitine,hypaconitine,mesaaconition.Resultspared of alkanoid, there is significant difference betilar ended that salty Aconiti Root is unilined in neacopoeia. Key carmichaeli Debx．的侧生子根及加工品。是四川道地药材之一［1］。《中国药典》［2］2005版附子项下规定了盐附子、黑顺片、白附片3种加工品，其中盐附子在炮制淡附片和炮附片时使用，临床是否直接使用未作规定；黑顺片、白附片为可直接入药的加工品种。在药性、药效和质量控制上3者并无明确区分。对生品与炮制品含量研究多有报道［2～4］，但均以单一方法为主，不能从整体上反映中药药性和毒效物质基础的特征。本课题拟采用适用性较好的滴定［1］、UV［1］、HPLC［4］对比测定3种加工品中总生物碱、酯型生物碱和乌头碱的含量，为规范附子不同加工品种的质量控制提供实验依据。 1 仪器与材料 1.1 仪器HPLC岛津LC10ATVP液相色谱仪，SPD10AVP紫外检测器，N2010数据处理软件；分光光度计，PerkinElmer Lambda35型；pHS2型酸度计(上海雷磁仪器厂) ； Sartorius系列十万分之一电子分析天平（德国）；R501B旋转蒸发器(上海申顺生物科技有限公司)；容量仪器均经校正。 1.2 对照品新乌头碱(1107999403)、乌头碱(110720200208)、次乌头碱(1107989403)对照品购自中国药品生物制品检定所。 1.3 试剂甲醇为色谱纯；淀粉为药用级；乙醇、溴甲酚绿、氯仿、硫酸、盐酸羟胺、高氯酸、乙醚、氨水皆为分析纯。实验用水为重蒸水，其他试剂自备。 1.4 药材盐附子、黑顺片、白附片购于四川省江油市恒源药业有限公司。盐附子、黑顺片、白附片为附子加工品，质量符合《中国药典》2005版Ⅰ部规定。经成都中医药大学中药鉴定教研室严铸云教授鉴定为乌头Aconitum carmichaeli Debx．的侧生子根。 2 方法与结果 2.1 溶液的制备 2.1.1 对照品溶液的配制 2.1.2 供试品溶液的制备取药材粗粉(1号筛)适量（白附片5 g，黑顺片5 g，盐附子1 g），精密称定，置具塞锥形瓶中，用氨水1 ml润湿，用乙醚-氯仿(3∶1)（总碱）50 ml冷浸24 h，滤过，残渣用50 ml混合液洗涤3次，合并洗液和滤液置蒸发皿中，水浴低温蒸干，残渣加混合液5 ml溶解，蒸干，加适量溶剂使溶解，定容于5 ml。 2.2 总生物碱含量测定照《中国药典》2005年版Ⅰ部制川乌含量测定项下方法［1］，供试品精密加入硫酸液(0.01 mol／L)10 ml,.freell与甲基红指示液3滴，用氢氧化钠液(0.02 mol／L)滴定至黄色。每毫升硫酸液(0.01 mol／L)相当于12.9 mg的C34H47NO11。求得总生物碱含量。结果表1。表1 不同加工品总生物碱含量测定结果（略） 结果表明，盐附子总生物碱含量是另两种加工品的5～6倍，黑顺片与白附片差别较小。 2.3 酯型生物碱含量测定 2.3.1 最大吸收波长的确定 照《中国药典》［1］2005年版Ⅰ部制川乌项下含量测定，将乌头碱碱性盐酸羟胺显色溶液在波长400～600 nm进行紫外扫描，在520 nm处有最大吸收，与药典中520 nm一致，故选择520 nm为测定波长。 2.3.2 标准曲线的绘制 精密量取乌头碱标准液0.00，0.20，0.50，1.0，1.50，2.00，2.50 ml，分别置于25 ml干燥具塞锥形瓶中，各依次加入无水乙醇至2.5 ml，各瓶中均加入碱性盐酸羟胺试液1.50 ml，在65℃水浴中保温10 min，取出冷至室温，加13.0 ml高氯酸铁试液，摇匀，放置5 min，再精密加入高氯酸溶液8 ml，用高氯酸铁试液稀释至刻度、摇匀，即得。以第1份为对照空