神经生长因子在诱导树突状细胞分化中作用.PDFVIP

中南大学学报（医学版） 2015, 40(8) htt p:// J Cent South Univ (Med Sci) 829 DOI:10.11817/j.issn.1672-7347.2015.08.002 /xbwk/fi leup/PDF/201508829.pdf 神经生长因子在诱导树突状细胞分化中的作用 夏清，谭洪毅，潘频华，苏晓丽，胡成平 ( 中南大学湘雅医院呼吸内科，长沙 410008) [摘要] 目的：在体外探讨神经生长因子 (nerve growth factor ，NGF)在刺激小鼠骨髓来源的树突状细胞 (dendritic cells ，DCs)分化过程中的作用。方法：首先取C57BL/6小鼠股骨、胫骨骨髓细胞，按培养过程中干预因素不同分为 磷酸盐缓冲液 (phosphate buff ered saline ，PBS)刺激组(PBS组，n=6) 、NGF刺激组(NGF组，n=6) 、粒巨噬细胞集落刺激 n 因子(granulocyte monocyte colony stimulating factor ，GM-CSF)和IL-4共刺激组(GM-CSF+IL-4组， =6) 、NGF加GM-CSF和 + − IL-4共刺激组(NGF+GM-CSF+IL-4组，n=6) ，培养第7天采用流式细胞仪比较各组间CD11c 细胞阳性率和CD8a 亚型比 例；然后用GM-CSF+IL-4刺激培养未成熟的DCs ，经CD11c免疫磁珠阳性分选得到纯化的未成熟DCs ，将其分为PBS组 (n=6) 、NGF组(n=6) 、脂多糖(lipopolysaccharide ，LPS)组(LPS组，n=6) 、NGF+LPS组(n=6) ，分别用PBS ，NGF ，LPS ， NGF+LPS诱导细胞成熟，24 h后酶联免疫吸附分析法 (enzyme linked immunosorbent assay ，ELISA)检测上清液中IL-6 ， IL-10和IL-12 的水平。结果：1) NGF组CD11c+DCs百分比高于PBS组，低于GM-CSF+IL-4组(均P 0.05) ；GM-CSF+IL-4 组与NGF+GM-CS F+IL-4组间比较，差异无统计学意义 (P 0.05) ，且在4组中均以CD8a−DCs 为主；2)NGF可以增强 LPS诱导的DCs分泌IL-6 ，IL-10和IL-12(均P 0.05) ，而单独NGF刺激对DCs分泌IL-6 ，IL-10和IL-12无影响 (均P 0.05)。 + − 结论：NGF可以诱导小鼠骨髓细胞向CD11c DCs 的定向分化，并且以CD8a 亚型为主；NGF能增强LPS诱导的DC分泌 IL-6 ，IL-10和IL-12 。 [关键词] 神经生长因子；树突状细胞；分化 Role of nerve growth factor in differentiation of dendritic cells XIA Qing, TAN Hongyi, PAN Pinhua, SU Xiaoli, HU Chengping (Department of Respiratory Medicine, Xiangya Hospi