基于激光剥蚀―电感耦合等离子体质谱技术生物元素成像探析.docVIP

基于激光剥蚀―电感耦合等离子体质谱技术生物元素成像探析 　　摘要 生物体内的微量元素具有十分重要的生物功能，也与许多疾病密切相关。现代生物医学的研究亟需能在组织、细胞等不同水平上原位分析生物样品中微量元素的分析方法。本研究建立了激光剥蚀电感耦合等离子体质谱（LAICPMS）原位分析生物样品的方法。采用线扫描模式和较小的激光输出能量（ 　　3.1剥蚀模式的选择 元素成像可采用点剥蚀模式（Spotablation）或线剥蚀模式（Lineablation）完成（图1）。在点剥蚀模式中，激光在样品表面每隔一定距离取一点剥蚀样品，重复操作直到激光采样的点阵覆盖整个样品。在此模式下，采集的数据真实反映每个采样点上的元素信息，激光光斑越小，采样点越多，得到的元素成像图的分辨率越高。而在线剥蚀模式中，在样品表面每隔一定距离设置一条剥蚀线段，重复设置剥蚀线段，直到激光采样的线段覆盖整个样品。工作时激光沿直线连续剥蚀样品，此时，元素成像图的分辨率取决于激光光斑、剥蚀频率、线扫描速率，以及剥蚀线间的距离等条件 LAICPMS分析时，如果采用点剥蚀模式，在两个剥蚀点之间需要耗费较多的时间等待质谱信号回到本底水平，才能进行下一点的分析。这样减少了有效质谱分析时间的比例，增加了元素成像分析所需要的时间。所以在本实验中，采用线剥蚀模式，并使用两种剥蚀参数分别应用于鼠脑切片和细胞样品（见表1）。需要注意的是，由于剥蚀参数的选择，最终得到的元素成像图在激光扫描的方向常会拉长变形，一般需要在最后处理过程中恢复原始比例 3.2激光能量的选择 与地质样品不同，生物样品的含水量较高，因此在剥蚀时，必须有效地控制剥蚀条件，既要实现完全剥蚀样品，又要避免用过高的能量剥蚀而使样品中的水大量汽化，造成样品不规则撕裂和严重的元素分馏。此外，在分析生物样品时，选择较低能量密度（ 　　6FletcherJS，RabbaniS，HendersonA，BlenkinsoppP，ThompsonSP，LockyerNP，VickermanJC.Anal.Chem.，2008，80（23）：9058-9064 7GaoY，LinYM，ZhangBC，ZouDX，HeMH，DongB，HangW，HuangBL.Anal.Chem.，2013，85（9）：4268-4272 8WangHJ，WangM，WangB，MengXY，WangY，LiM，FengWY，ZhaoYL，ChaiZF.J.Anal.At.Spectrom.，2010，25（3）：328-333 9BeckerJS，ZoriyM，MatuschA，WuB，SalberD，PalmC，BeckerJS.MassSpectrom.Rev.，2010，29（1）：156-175 10HareD，AustinC，DobleP.Analyst，2012，137（7）：1527-1537 11KonzI，FernandezB，FernandezML，PereiroR，SanzMedelA.Anal.Bioanal.Chem.，2012，403（8）：2113-2125 12YANGHongXia，ZHAOLingHao，GAOJinXu，LIUWei，LIBing.ChineseJ.Anal.Chem.，2014，42（3）：355-359 ?詈煜迹?赵令浩，高津旭，刘葳，李冰.HTK分析化学，2014，42（3）：355-359 13FENGLiuXing，WANGJun.ChineseJ.Anal.Chem.，2014，42（4）：536-541 冯流星，王军.HTK分析化学，2014，42（4）：536-541 14KochJ，GuntherD.Appl.Spectrosc.，2011，65（5）：155-162 15GuillongM，HornI，GuntherD.J.Anal.At.Spectrom.，2003，18（10）：1224-1230 16GuntherD，HeinrichCA.J.Anal.At.Spectrom.，1999，14（9）：1363-1368 17FeldmannJ，KindnessA，EkP.J.Anal.At.Spectrom.，2002，17（8）：813-818 18LearJ，HareDJ，FryerF，AdlardPA，FinkelsteinDI，DoblePA.Anal.Chem.，2012，84（15）：6707-6714 19SeumaJ，BunchJ，CoxA，McLeodC，BellJ，MurrayC.Proteomics，2008，8（18）：3775-3784