酿酒酵母CNU94发酵生产超氧化物歧化酶（SOD）的研究.pdfVIP

酿酒酵母CNU94发酵生产超氧化物歧化酶(SOD)的研究 摘 要 从50株不同种属的酿酒酵母中筛选出～株生物量及SOD含量均较高的酵母菌 B94，以其为出发菌进行了原生质体紫外线诱交，亚硝基胍及鲫130-Y射线复合诱变育种， 且遗传性能稳定，是一株有生产潜力的高产SOD菌株。 对突变株CNU94的发酵工艺条件进行了正交试验及单因子条件实验，确定了其发 酵产酶的优化培养条件为：培养基组成为葡萄糖296，蛋白胨296，酵母膏1％，7。舱麦芽 ml／500ml三 角瓶，接种量15％，培养20小时加H2晓至终浓度为1％，继续培养至24小时。在此条 产量较出发菌提高99％。 酿酒酵母CNU94经发酵培养后，离心收集菌体，将菌体用甲苯法破壁得到粗酶液， 粗酶液经500C加热，调节口H除杂蛋白，丙酮分级沉淀后，上DEAE纤维素．32柱层析 30．43倍。PAGE电泳后的活性染色结果显示，酵母超氧化物歧化酶具四条同功酶，蛋白 染色结果显示酶纯度已达电泳纯。该酶经酶类型鉴定为Ckl／ZnSOD。 关键词：酿酒酵母CNU94，SOD，诱变育种，发酵条件，纯化 Studieson Production Fermentationof by cerevisiaeCNU94 Saccharomyces Abstract The$tlainof cerevisiaeB94 Sacchammyces wasobtainedfrommolethan50strainsof and SOD contentismolothan freshcell．BasedO／1 different印ecicsgeneraofyeasts．Its 800u／g this SOD mutantwasobtained of strain，a high-producing throughcompound UV mutagemc treatmentto and contentofthemutantreached protolast，NTGeCOy-rays．The 1872u／gflesh Was than cell．which134 strains．GenetictestshoweditWasanexcellent high origillal stability SOD producer． Basedon andmonofactorialmediumandfermentalion orthogonal test,the conditionWas studied，It showedtheoptinmlmedium culturecondition ex嗽CuS0475mmol／tlll，ZnSO,25mmol／ml；theoptimal peptone，1％yeast wercasfol