苏云金杆菌HBF-1菌株在土壤中毒蛋白含量的ELISA检测.pdfVIP

维普资讯 23(3)263—268 中国生物防治 ChineseJournalofBiologicalCon~ol 2007年 8月 一 ～ 一 一 ～ 》 实验技术 { 一 。 一 。 苏云金杆菌HBF．1菌株在土壤中 毒蛋 白含量的ELISA检测 吴瑞华 ，李国勋 ，王容燕 ，王金耀 ，冯书亮 (1．河北农业大学植物保护学 院，保定 071001；2．河北省农林科学院植保所 ，保定 071000；3．莱阳农学 院，青岛 266109) 摘要：以苏云金芽孢杆菌HBF一1菌株 中分离纯化的高特异性杀虫蛋 白作为抗原，免疫新西兰 白兔制备出多克隆抗体，其效价可达到 16000。应用制备的特异性抗体建立 了间接酶联免疫 吸附测定法(ELISA)，检测不同土壤样 品中Bt毒蛋 白含量。初步结果表 明，该方法能够检测土 壤 中Bf毒蛋 白的含量，因土壤理化特性及组成成分 的不 同，检测到的毒蛋 白含量也略有不同， 河沙中的蛋 白检测量最低，只有 12．53％；另一种沙壤混合物中检测量达到76．16％。 关 键 词 ：HBF一1菌株 ；毒蛋 白；多克隆抗体；间接ELISA；土壤 中图分类号：$476．12 文献标识码 ：A 文章编号：1005—9261(2007)03．0263-06 DetectionofBacillusthuringiensisStrainHBF·1Protoxin inSoil byEnzyme·linked ImmunosorbentAssay WU Rui—hua，LIGuo—xun，WANG Rong·yan，WANGJin—yao，FENG Shu·liang (CollegeofPlantProtection，AgriculturalUniversityofHebei，Baoding071001，China) Abstract：W iththeSDS·PAGEpreparationeleetrophoresis，highqualityinsecticidal proteinwaspurified 收稿 日期 ：2006．．09．．26 基金项 目：国家 863计划 (2006AAO2Z189)；河北省 自然科学基金项 目(G20050006420)；河北省农科 院青年基金项 目 ( 作者简介 ：吴瑞华(1981一)，女 ，硕士生 ；*通讯作者 ，E．mail：fshliang@heinfo．net。 [5] BegumS，WahabA，SidddiquiBS．NematicidalconstituentsoftheaerialpartsofLantanacamera[J]．JournalofNaturalProduct， 2000，63：765—767． [6] 赵博光 ．苦豆碱对松材线虫的杀线活性[J]．林业科学，1996，32(3)：243—247． [7] FischerNH，LuT，CantrellCL，eta1．Antimycobactefialevaluationofgermacranolides~J]．Phytochemistry，1998，49(2)：559— 564． [8] NakshatriH，RiceSE，Bhat．NakshatriP．Antitumoragentparthenolidereversesresistanceofbreastcancercellstotumornecrosis factor-relatedapoptosis—inducingligandthroughsustainedactivationofc—JunN—terminalkinase[J]．Oncogene，2004，23：7330— 7344． [9] Li．weberM，GiaisiM，BaumannS，eta1．Thenati．inflamma