昆虫病原线虫共生菌胞内外蛋白的提取及杀虫活性比较.pdfVIP

维普资讯 中国生物防治 ChineseJournalofBiologicalControl 2007年 2月 昆虫病原线虫共生菌胞内外蛋白的提取 及杀虫活性比较 杨保军 ，杨怀文 ，刘 峥 ，杨秀芬 ，袁京京 (1．中国农业科学院植物保护研究所，北京 100081；2 中国水稻研究所／水稻生物学 国家重点实验室 ，杭州 310006) 摘要：通过超声波破碎、硫酸铵盐析等方法从 10株 昆虫病原线虫共生菌的发酵液 中分离出各 菌株的胞 内和胞外蛋 白，测定各蛋 白样 品含量及其对棉铃虫初孵幼虫的生长抑制毒性，并用 Native．PAGE和 SDS．PAGE对各粗蛋白组分进行初步分析。结果表明有7个菌株 的胞 内和胞外 蛋 白对棉铃虫初孵幼虫生长均显示出不同程度 的抑制生长活性。其中以嗜线虫致病杆菌3个 菌株 CB6、All和 Bw活性最强，其胞 内蛋 白的活性分别达 97．1％、97．9％、97．2％，胞外蛋 白分 别达 95．8％、96．3％、88．6％。不同菌株胞 内胞外蛋 白产量各不相同。电泳 图谱表 明，不同菌 株 间及 同一菌株胞 内胞外蛋白有差异，但近缘菌株相似。 关 键 词：昆虫病原线虫共生菌；胞 内蛋 白；胞外蛋 白；毒性；棉铃虫 中图分类号：$435．622．3；$476．11 文献标识码：A 文章编号：1005．9261(2007)01．0033．06 Comparison ofToxicitybetweenExtracellularandlntracellularProteinsof EntomopathogenicNematodeSymbioticBacteriaagainstHelicoverpaarmigera YANGBao-inn，YANGHuai-wen，LIUZheng，YANGXiu-fen，YUANJing-jing (InstituteofPlantProtection，CAAS，Beijing10008，China) Abstract：Inthisstudytheextracellularand intracellularproteinswereextractedfrom thefermentation cultureoftenstrainsofthesymbioticbacteriabymeansofcelldisruption，ammonium sulfateprecipita- tion．Theproteinconcentrationsweredetemr ined．Th eiroraltoxicitiesagainstneonatallarvaeofHelicov- erpaarmigera Hfibnerweretested．TheproteincomponentswerenaalyzedwiththetechnicheofNative- polyacrylamidegelelectrophoresis(Native)andsodiumdodecylsulphate-polyacrylamidegelelec- trophoresis(SDS)．Theresultsindicatedthattherewerevariousinhibitoryactivitiesoftheextra． cellularproteinsnad intracellularproteinsfrom seven strainsagainstthelarvaofH ．armigera．Th ree strainsofXenorhabdusnematophilaCB6，AllandBw showedsignificnatweightinhibition．Th einhibition percentagesreached to97．1％ ，97．9％ ，972％ forintracellularproteinsnad95．8％，96．3％ ， 88．6％ forextracellularproteinsrespectively．Th eeffectofintracellularproteinsseemsstrongerthna that o