微生物教程yyd第八章微生物的遗传变异和育种.pptVIP

第一节 遗传变异的物质基础 第二节 基因突变和诱变育种 第三节 基因重组 第四节 基因工程 第五节 菌种的衰退、复壮和保藏 第一节 遗传变异的物质基础一、三个经典实验 （一）经典转化试验 F．Griffith（1928年） 肺炎双球菌，可使人患肺炎，也可使小 白鼠患败血症而死亡。它有多种菌株，其中 具有荚膜，且菌落表面光滑（smoth）的致 病菌株,称S型;另一种不形成荚膜,菌落粗糙 （rough）,无致病性,称R型。 F．Griffith作了3组实验如下图 （二）噬菌体感染试验 1952年，A.D.Hershey和M.Chase将 E.coli分别培养在以放射性32PO43-或35SO42-作为磷源或硫源的组合培养基中，得到两种噬菌体:一种含32P-DNA为核心的噬菌体，一种含35S-蛋白质外壳的噬菌体。 实验如下图 噬菌体感染实验 植物病毒的重建实验 （一）七个水平 细胞水平 细胞核水平 染色体水平 核酸水平 基因水平 密码子水平 核苷酸水平 （四）基因突变自发性和不对应性的实验证明 变量实验 又称彷徨试验或波动实验 材料：噬菌体T1——涂布在平板上作为所抗的环境因素； 对噬菌体T1敏感的E.coli——待实验菌株 变量试验 影印培养试验 （3）染色体畸变 包括染色体结构的缺失、重复、插入、易位、倒位 几种情况，也包括染色体数目的变化。 1〉染色体内畸变：只涉及一条染色体上的变化，上 述几种均可发生。 倒位：断裂下来的一段染色体逆转，然后，重新插入到 原位置。 易位：断裂下来的一小段染色体再顺向或逆向地插入同 一染色体的其他部位上。 2〉染色体间畸变：非同源染色体间的易位。一小段 DNA断下后，可跳到另一条染色体上插入；质粒上的DNA 跳到另一个质粒上，此种情况亦属于染色体间畸变。 （原核微生物仅一条染色体，不存在“另一条”。) 严格地说，DNA从一个细胞跳到另一个细胞的易位， 亦属于染色体间畸变。 总之，原核、真核微生物都存在染色体间畸变。 2.自发突变机制 自发突变：生物体在无人工干预下自然发生 的低频突变。 自发突变的原因一般有： 背景辐射和环境因素的诱变 例如：宇宙辐射、南北极磁场等。 微生物自身有害代谢产物的诱变效应 例如：过氧化氢、过氧化物等。 DNA复制过程中碱基配对错误引起 据统计，DNA链在每次复制中每个碱基对错配频率是10-7-10-11，这样一个基因的自发突变几率约为10-6。 紫外线对DNA的损伤是引起相邻嘧啶形成嘧啶二聚 体（TT，TC，CC）。造成局部DNA分子无法配对。 微生物有多种修复受损DNA的作用，现举两例： 光复活作用 经紫外线照射诱变的微生物立即暴露在可见光下，则微生物的死亡率和突变率将明显降低的现象，称光复活作用。 机理：诱变形成的嘧啶二聚体在暗处结合光激活酶， 在有可见光的情况下，此酶吸收光能，解离嘧啶二聚体。 暗修复作用 又称切除修复，经紫外线诱变损伤的DNA在不见光的条件下，依靠微生物体内的四种酶来修复受损的DNA。 即：内切核酸酶、外切核酸酶、DNA聚合酶、连接酶。 过程如下图 第三节 基因重组 　 　　基因重组的定义：把两个不同性状个体的遗传基因转移到一起，经过遗传分子间的重新组合，形成新的遗传型个体的方式，称基因重组或遗传重组。 　 基因重组可以理解成遗传物质分子水平上的杂交，即核酸水平上的杂交。而传统意义上的杂交通常指的是细胞水平的杂交，如杂交动物、杂交植物等。但所有细胞水平上的杂交都是以基因重组为基础的。 　 微生物的基因重组分原核微生物和真核微生物两大类进行研究。 一、原核微生物的基因重组 　　 原核微生物的基因重组包括转化、转导、结合和原生质体融合等四种形式。 （一）转化　 　　受体菌直接吸收来自供体菌的DNA片段，通过交换、把它整合到自己的基因组中，从而使受体菌获得了供体菌的部分遗传性状的现象称为转化。转化的结果是形成转化子。即转化子是通过转化获得供体细胞部分遗传物质并表现出相应性状的重组受体菌。 　　而来自供体菌的DNA片段称转化因子。 　　转化过程见下图 　 （一）转化　 两个菌株间能否发生转化与多种因素有关，如两个菌株进化过程中的亲缘关系、供体DNA的形式及菌株的具体生理状态等，其中最重要的是受体菌生理状态——感受态。 供体的DNA片段形式 ： 不同形式的供体菌DNA片段，发生转化的频率也有区别，其中质粒形式的DNA片