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引物设计实例分析分析
引物设计;引物设计基本原则;1. 引物的长度;2.扩增片段的长度;3. 引物溶解温度(Tm值);4. 引物的GC含量;5. 引物自身;任务
用绿色荧光蛋白(GFP)标记蛋白NR1;;;;
121 ggggctccta gagaacccgg gggcgcttga ccgcgcgcgg gcggcccgcg ggtcgtacat
181 cgcgaggtcg tcgcactcgc gcaacccaga gccaggcccg ctgtgcccgg agctcatgag
241 caccatgcac ctgctgacat tcgccctgct tttttcctgc tccttcgcc c gcgcggatcc
301 cgaccccaag atcgtcaaca tcggcgcggt gctgagcacg cgcaagcatg aacagatgtt
361 ccgcgaggca gtaaaccagg ccaataagcg acacggctct tggaagatac agctcaacgc
421 cacttctgtc acccacaagc ccaacgccat acagatggcc ctgtcagtgt gtgaggacct
481 catctctagc caggtctacg ctatcctagt tagccacccg cctactccca acgaccactt
541 cactcccacc cctgtctcct acacagctgg cttctacaga atccctgtcc tgggactgac
601 tacccgaatg tccatctact ctgacaagag tatccacctg agtttccttc gcacggtgcc
661 gccctactcc caccagtcca gcgtctggtt tgagatgatg cgagtctaca actggaacca
721 catcatcctg ctggtcagcg acgaccacga gggacgggca gcgcagaagc gcttggagac
781 gttgctggag gaacgggagt ccaaggcaga gaaggtgctg cagtttgacc caggaaccaa
;
ATGGTGAGCAAG GGCGAGGAGC TGTTCACCGG GGTGGTGCCC ATCCTGGTCG AGCTGGACGG CGACGTAAAC GGCCACAAGT TCAGCGTGTC CGGCGAGGGC GAGGGCGATG CCACCTACGG CAAGCTGACC CTGAAGTTCA TCTGCACCAC CGGCAAGCTG CCCGTGCCCT GGCCCACCCT CGTGACCACC TTCGGCTACG GCCTGCAGTG CTTCGCCCGC TACCCCGACC ACATGAAGCA GCACGACTTC TTCAAGTCCG CCATGCCCGA AGGCTACGTC CAGGAGCGCA CCATCTTCTT CAAGGACGAC GGCAACTACA AGACCCGCGC CGAGGTGAAG TTCGAGGGCG ACACCCTGGT GAACCGCATC GAGCTGAAGG GCATCGACTT CAAGGAGGAC GGCAACATCC TGGGGCACAA GCTGGAGTAC AACTACAACA GCCACAACGT CTATATCATG GCCGACAAGC AGAAGAACGG CATCAAGGTG AACTTCAAGA TCCGCCACAA CATCGAGGAC GGCAGCGTGC AGCTCGCCGA CCACTACCAG CAGAACACCC CCATCGGCGA CGGCCCCGTG CTGCTGCCTAC CAGTCCGCCC TGAGCAAAGA CCCCAACGAG AAGCGCGATC ACATGGTCCT GCTGGAGTTC GTGACCGCCG CCGGGATCAC TCTCGGCATG GACGAGCTGT ACAAGTAA;引物要求;
5’ ATGGTGAGCAAGGGCGAGGAGC …………TCTCGGCATGGACGAGCTGTACAAGTAA 3’
3’ TACCACTCGTTCCCGCTCCTCG……………AGAGCCGTACCTGCTCGACATGTTCATT 5’
;第二步:GC比值;Tm值;第三步:酶切位点;第四步:阅读框;atgagcaccatgcacctgctgacattcgccctgcttttttcc
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