E2和P4浓度在奶牛发情周期中与卵泡发育对比分析.pdfVIP

中国奶牛·2007年增刊 中国奶业协会2007年会论文集 119· E：和P4浓度在奶牛发情周期中与卵泡发育对比分析 李桂芝t，李飞2，马会明2 (1_新疆博乐农五师八十一团，博乐833411；2．新疆石河子大学动物科技学院，石河子832003) 中图分类号：$823，3文献标识码：B 摘要：选择从澳大利亚购进的2岁左右发情周期为21天的育成母牛10头，用放射免疫测定法(RIA)测定发情周期 基金项目：新疆兵团科技扶贫专项(05xt05)，项tt名称：奶牛改良技术体 系建设。 作者简介：李桂芝(196扣)，女．安徽灵壁县人，畜牧师，主要从事奶牛生 1@163∞m 产和科学技术研究T作。E—mail：I$z767141 通讯作者：李飞。男，教授，从事动物繁殖与育种方面研究工作。 E-mail：U瓜hz@163咖 趋势。原因可能是虽然蚓激酶基因已经整合到奶牛乳 颗粒，从而扩大了病毒的寄主范围M。采用Lipofectamine 腺组织，但随着时间延长犊牛逐渐断奶，对母牛乳腺 Reagent进行转染，其表面带有正电荷，可以通过静电作 用与带有负电荷的DNA或RNA结合，对DNA片段大小的刺激逐渐减少，从而导致乳腺组织代谢水平降低， 没有限制，从而提高了核酸运载效率和转染效率。同时 奶量减少的同时其中蛋白的表达量也随之降低。我们 实验结果表明外源polyA信号的插入能屏蔽核酸外切通过SDS—PAGE检测结果同样表明牛奶中有蚓激酶 的表达。分子量比理论值稍大，可能是其经糖基化等 酶对mRNA分子的3’一5’方向的降解作用。从而维持了 mRNA初级转录本暂时稳定性，并实现蚓激酶在奶牛乳修饰的结果。 腺组织的高效表达。但由于在mRNA成熟分子形成之前 本试验还表明质粒以直接注射方式转染奶牛乳 发生的剪切作用会将其删除，正向插入pdyA信号的表腺。对乳腺组织无损伤。对受试奶牛进行了跟踪观察 达核可能引起3’LTR丢失；导致实验中仅反向插人表达后，未发现继发感染和泌乳能力下降等情况，而注射后 质粒对受试动物的远期影响正在迸一步研究中；注射 核的重组逆转录病毒载体pLN—BCP-LK“转染包装细胞 后能够实现病毒包装，获得具有感染性的逆转录病毒。 逆转录病毒感染奶牛乳腺组织可以实现蚓激酶基因的 我们将重组质粒分男0以200斗g、500txg、1OOOp．g、 稳定整合，并在奶中长期表达，这为建立蚓激酶乳腺生 2 物反应器奠定了非常良好的基础。 000斗g注入奶牛乳腺组织，经FAPA法活性检测表明 蚓激酶在牛奶中表达可持续到78h，且随时间变化表达 参考文献 H，SumJH，AkazawaT，et吐册皿lMnb 量先升高后降低直至消失，这与前人报道朔所提到的 f1]Mihara 25蝴63． 外源基因在细胞系中的瞬时表达时间一般可持续96h E，VitalJ [2]CordonK，Lee A，et丑1【口8io 1)： 以上基本一致，而且从分析结果表明，质粒剂量的增 1183—1187． 加与表达效果成正比，但到一定域值时，无论剂量怎 样增加，表达效果都相对稳定，本试验所构建的逆转 ADand [