乙二胺四乙酸钠、能量基质、氨基酸对猪卵母细胞的体外成熟和早期孤雌发育的影响.pdfVIP

广 西 农 业 生 2006年9月 f,21.52e5,Situfpq. JournalofGuangxiAgric.an}Biol.s。i* Sept.，2006 文章编号:1008一3464(2006)增一0188一02 乙二胺四乙酸钠、能量基质、氨基酸对猪卵母细胞的 体外成熟和早期孤雌发育的影响 卢晨盛,2‘，魏凤.2‘，兰宗宝,2‘，房慧伶 “，陆阳清’,2，卢克焕1,2 王爱德2 (广西大学 1 广西亚热带生物资源保护利用重点实验室，2 动物科学技术学院，广西南宁530005) 摘要:本研究探讨了:(1)成熟培养基中葡萄糖和丙酮酸钠剂量对猪卵母细胞体外成熟极体排放 率的影响;(2)培养基中葡萄糖、谷氨酞胺、牛磺酸和亚牛磺酸的剂量对猪孤雌激活胚胎体外发育的 影响，同时探讨不同浓度乙二胺四乙酸钠 (EDTA-Na)对猪孤雌激活胚胎体外发育的影响。利用屠宰 场猪卵巢卵母细胞，在含不同剂量葡萄糖+丙酮酸钠的成熟液中体外成熟44^48h，计算其极体排放 率 (试验1)，进行化学法孤雌激活后，在含不同剂量的葡萄糖+谷氨酞胺+牛磺酸+亚牛磺酸与不同 浓度的EDTA-Na的培养基中体外培养，计算孤雌激活胚的第48小时卵裂率和第168小时囊胚率 (试 验2)。结果表明:(1)葡萄糖十丙酮酸钠在1倍剂量 (浓度分别为3.05mmol/L和0.91mmol/L)时， 猪卵母细胞体外成熟的核成熟率为 (59.3士5.0)00，当其剂量加倍时，猪卵母细胞体外成熟的核成熟 率极显著下降 (P0.01)，为 (51.0士4.4)00;(2)随着EDTA-Na添加浓度的增加，猪孤雌激活胚 的的囊胚发育率不断上升，添加浓度达到50Ajmol/L时囊胚率最高 (7-2士4.1)0o，超过此浓度后囊胚 率开始下降，培养基中添加适当浓度 (25-100limol/L)的EDTA-Na对猪孤雌激活胚的囊胚发育率具 有有利作用 (P0.05),添加浓度达到200jimol/L时其有利作用消失;(3)培养基中葡萄糖+氨基酸 的剂量过高 (葡萄糖、谷氨酞胺、牛磺酸、亚牛磺酸的浓度分别大于5.55,1.0,7.0,5.0mmol/L) 对猪孤雌激活胚的卵裂率无显著影响 (PO.05)，但对其囊胚发育率有不利作用 (PGO.05)。本研究 得出以下结论:(1)适当浓度 (25^-100fcmol/L)的EDTA-Na对猪早期胚胎体外发育具有促进作用; (2)培养基中能量基质剂量过高会抑制猪卵母细胞体外成熟;(3)培养基中能量基质十氨基酸的剂量 过高会抑制猪早期胚胎的体外发育。 关键词:乙二胺四乙酸钠;能量基质;氨基酸;猪;卵母细胞;孤雌激活;胚胎 中图分类号:Q132;Q492;Q813.7;S814.,8 文献标识码:A 收稿日期:2006-08-08, 签金项目:广西亚热带生物资源保护利用重点实验室一省部共建国家重点实验室培育基地开放课题 (SB0505);广西 科学荃金项目(桂科青0640002和桂科青0447004);广西科学研究与技术开发计划项目(桂科攻0537022- 01和桂科攻0330004-14);广州市华粤行仪器有限公司南宁办事处计划内横向项目。 作者简介:卢最盛 (1971一)，男 (壮族)，广西南宁人，广西大学副研究员，博士;E-mail:sslu@, 魏凤 (1979一)，女，河南遂平人，硕士研究生;E-mail:weifeng200879@. 通讯作者:卢克焕 (1945一)，教授，博士生导师;E-mail:khlu@, 增刊 卢最盛等:乙二胺四乙酸钠、能量基质、氨墓酸对猪卵母细胞的体外成熟和早期孤雌发育的影响 189 Effectsofethylenediaminetetraaceticacid，energysubstrate，am ino acidsoninvitromaturationofporcineoocytesandinvitro developmentofporcineparthenogeneticembryos LUSheng一sheng`，WEIFengZ，LANZong一bao`，FANGHui一ling， LUYang