利用基因芯片分析孕妇外周血浆APC基因甲基化的初步研究论文.docVIP

　　利用基因芯片分析孕妇外周血浆APC基因甲基化的初步研究论文 .freelicroarray to analyze methylation pattern of the APC gene in maternal plasma in pregnant an 【Abstract】 Objective Detection of the relationship betethylation pattern of the APC gene in maternal plasma in pregnant an and the state of pregnancy， and estimation the potentiality that applicate to noninvasive prenatal diagnosis. Methods Plasma DNA peripheral blood of pregnant en， then after bisulphate-treat， the methylation pattern of CpG site in the APC promoter icroarray-based method. The methylation pattern of differential stages in pregnant en and nonpregnant en icroarray. Results The methylation prattern of CpG site in the APC promoter in healthy nonpregnant en are densely methylation and in pregnant en are hypomethylation or unmethylation. The degree of methylation in pregnant en are distinction. Conclusion There are relationship betethylation pattern of the APC gene in maternal plasma in pregnant en and the pattern of the differential stages and times of pregnancy. The DNA microarray can be applied as a high throughput tool to map methylation patterns in CpG island sites. The analysis of DNA methylation in plasma ethylation; noninvasive prenatal diagnosis;gene microarray; APC gene 1997年，Lo等［1］首次报道在母体血循环中发现了游离胎儿DNA，证实了母体血浆中的DNA是胎儿和母体DNA的混合体，这一发现为无创性产前诊断开辟了新的方法。但以往对孕妇外周血中游离胎儿DNA的应用大多局限在检测胎儿从父亲一方继承来的基因或突变，且检测的胎儿基因必须能与母亲DNA 序列显著区分开来。2002 年， Poon等［2］利用后生性标志，如胎儿与母体DNA 甲基化的差异来区分两者，冲破了上述限制，这种表遗传上的差异为无创性产前诊断提供了新的思路。但是，对在妊娠与未孕妇女外周血浆中基因甲基化模式是否存在一定的关系，在不同妊娠期之间孕妇血浆中基因的甲基化模式是否存在一定关系等问题，目前还没有报道。 正常妊娠时，细胞滋养层细胞侵入子宫蜕膜及其脉管系统，其发生在妊娠8～18周之间，侵入过程与癌细胞在转移的时候有一些相似，因为细胞必须通过基底层。先兆子痫的发病机制可能与滋养层细胞在妊娠前3个月侵入子宫肌层失败有关。Muller等［3］发现妊娠妇女和转移性乳腺癌病人在APC基因甲基化的改变上存在相似性。因此，本实验选择APC基因作为研究对象。 本实验以妊娠不同时期APC基因启动区不同CpG位点甲基化模式为基础，通过基因芯片对其变化规律进行探索性研究，寻找出它们之间的差异，以期可以作为生理或疾病状态的标志物，并进一步应用于无创性产前诊断。 1 资料与方法 1.1 研究对象 从2005年5月～8月在东南大学附属中大医院妇产科进行产前检查的初孕妇中，随机选择82例作为研究对象，其中妊娠4～12周(早期)24例，13～27周(中期)24例，28～40周(晚期)24例，产后1周10例。年龄23～35岁，初孕，临床无感染征象，无其他产科合并症及并发症。同时随机选取未孕健康女性18