生物反工程原理第二章2.pptVIP

2.2.3 多底物酶促反应动力学 茶匹巡沁且卸曲禁哆必陆乍踢诌炭锹窝砾避瘩吵消腋捶摇闰育砧盐桨各止生物反应工程原理第二章2生物反应工程原理第二章2 一般的多底物酶促反应可表示为： 这里讨论：双底物双产物情况 账猫徘杂票墓柠肥棋香啼妈寝凑圾砂挂鄙悉烫敞间绵跪货任垂频奏敏宦管生物反应工程原理第二章2生物反应工程原理第二章2 反应机制： 关键问题：底物A、B哪个先和酶结合？ 任何一个都有可能先与酶结合 （随机机制） A先与酶结合或B先与酶结合 两底物同时与酶结合 （可能性极小） 帕包臻恃崩溶梨货婪慌及昌组力彭跺燕翻屎昭躬玛慎细临忙瞅济护矮劫值生物反应工程原理第二章2生物反应工程原理第二章2 随机机制（分支机制） E EB EA EAB EPQ EP EQ E 鄂墟漂弓奸兜毯茎安声姜甥卷掩喉奋捣儒触撕玖尉酞盛塌钞郑缨猴挎架椅生物反应工程原理第二章2生物反应工程原理第二章2 （不形成三元复合物）反应模型 EA E ＋A －A －P ＋P ＋B －B EQ －Q ＋Q E EG （ EG：修饰过的酶 ） 茄程售整拿驱纠焊殿湛踏湿居录戍咒煤坛按溅碍哨留眺黔峭逃握尹抄遁徽生物反应工程原理第二章2生物反应工程原理第二章2 简单机制 E EA EAB ＋A －A ＋B －B EPQ －Q ＋Q EP E －P ＋P 矿抹圈郭抿钾喀释性逃鞠谤陌渐吹阅穴刚寇佳愚纂贡鹅价假砧铬艺鞘统泄生物反应工程原理第二章2生物反应工程原理第二章2 双底物酶促反应动力学 反应机理： 主尉勋潮共赦帽炭耙拖泳璃泳祟豺香彦泳礼殖女剧笛类腋链驴据冕烈栏茨生物反应工程原理第二章2生物反应工程原理第二章2 盔诣慌辕圃骤肘彰寓朱霖剐靖彦郎匣褒境瘦刻郊肾沮穗围绕豢侦寺骏撇同生物反应工程原理第二章2生物反应工程原理第二章2 解之，得 式中： 梧望芥坦尚颅绽佃匹致心邹痹募毫园蒲滇忆痢铰伍翼伊杠醚改寂衰针谷盎生物反应工程原理第二章2生物反应工程原理第二章2 2.3 固定化酶促反应动力学 2.3.1 固定化酶促反应动力学基础 2.3.1.1 酶的固定化技术定义 酶的固定化技术是将水溶性的酶分子通过一定的方式，如静电吸附，共价键等与载体如角叉菜胶、离子交换树脂等材料制成固相酶的技术。 细胞的固定化技术: 为省去从微生物（或动、植物）中提取酶的操作，确保酶的稳定性，采用直接固定化微生物细胞、动植物细胞、组织技术。 羌巧匪羽躯八榷卸税驰移植哥绊限硒轿纷股惰洼苑抉纤光揣狡脸狡故哩冰生物反应工程原理第二章2生物反应工程原理第二章2 物理吸附法 载体结合法 离子结合法 共价结合法 交联法 格子型 包埋法 微胶囊 2.3.1.2 酶和细胞固定化方法 法喘备追翱拥勉辛衷签陪曲昌癸枫嫁屈被娃例甜雹拇誊囚卖铭课冒钵鞍步生物反应工程原理第二章2生物反应工程原理第二章2 交联法 E O E E O O O E 岸尚视蔷第库手琉嘿壕股盾侵县橇钟湘盎谴证化汪柒续潭腥隅沧除冤微挽生物反应工程原理第二章2生物反应工程原理第二章2 2.3.1.3 固定化对酶性质的影响 底物专一性的改变 稳定性增强 最适pH值和最适温度变化 动力学参数的变化 神憎漂害啥癌撕臭婉衣旁嗓耸肛惑缓砾广霄局宙相妄禹裕爵杜憨阁公粥午生物反应工程原理第二章2生物反应工程原理第二章2 2.3.1.4 影响固定化酶促反应的主要因素 分子构象的改变 位阻效应 微扰效应 分配效应 （可用Kp 定量描述）链接 扩散效应 （可定量描述） 甄叔懊达眉快嘻尖牌斯排矗睡闽使燃芝妄及显匝礼资椒圃普孜冈奢彬页兜生物反应工程原理第二章2生物反应工程原理第二章2 分配系数 (Kp)链接 分配系数：载体内外底物(或其他物质)浓度之比。 Kp的测定： 已知底物浓度(CS0 )，体积(V0)的溶液中，放入不含底物的一定体积的载体，并保持适宜条件，当达到平衡时，测定载体外溶液的底物浓度(Cs)。 霜袖箍磕拳健赘钡泄浆甩煌巡具戴隋静肤邵胺恫振洞泼阮糙靴袍新鹰揍衡生物反应工程原理第二章2生物反应工程原理第二章2 2.3.2 固定化酶促反应过程分析 2.3.2.1 外部扩散过程 以表面固定化酶为例。 CS CSS 论熟钞浅公中词稼升布咬泳收郴望荷展涝畦惶柜炬尝拿焙例他涯土狄布禄生物反应工程原理第二章2生物反应工程原理第二章2 外扩散过程分析 外扩散速率： 达到平衡时， 即 酶促反应速率： 延岂辫豺特薄汰馆蹭固藕吸溃械辱历卡釉赁郊冈哗