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- 2017-06-14 发布于河南
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酶联免疫吸附法(enzyme linked immunosorbent assay ,ELISA) 基础:抗原或抗体的固相化及抗原或抗体的酶标记。加入酶反应的底物后,底物被酶催化成为有色产物,产物的量与标本中受检物质的量直接相关,由此进行定性或定量分析。 ELISA可用于测定抗原,也可用于测定抗体。在这种测定方法中有三个必要的试剂: (1)固相的抗原或抗体,即免疫吸附剂; (2)酶标记的抗原或抗体,称为结合物; (3)酶作用的底物 ELISA基本原理 (1)使抗原(或抗体)结合到某种固相载体表面,并保持其免疫活性;(2)使抗原(或抗体)与某种酶联结成酶标抗原(或抗体),而且此酶标抗原(或抗体)既保留其免疫活性,又保留其酶活性;(3)测定时将受检标本(抗体或抗原)和酶标抗原(或抗体)按不同步骤与固相载体表面的抗原或抗体进行反应,再用洗涤方法使固相载体上形成的抗原抗体复合物与其它物质分开,最后结合在固相载体上的酶量与标本中受检的抗体或抗原量成一定比例;再加入酶反应底物后,底物被酶催化后变为有色产物,根据其颜色反应的深浅进行定性或定量分析,以了解被测标本中抗体或抗原含量 竞争法ELISA可用于抗原和半抗原的定量测定,也可对抗体进行检测, 其原理是标本中的抗原(抗体)和一定量的酶标抗原(抗体)竞争与固相抗体(抗原)结合。标本中抗原(抗体)含量愈多,结合在固相上的酶标抗原(抗体)愈少,
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