双丹口服液对环磷酰胺大鼠股骨生物力学和生化指标的影响论文.docVIP

　　双丹口服液对环磷酰胺大鼠股骨生物力学和生化指标的影响论文 【摘要】 目的观察双丹口服液对环磷酰胺造成大鼠的骨质疏松模型的影响。方法用4.5 mg·kg-1·d-1的环磷酰胺灌胃给大鼠，连续15 d，造成大鼠骨质疏松模型；用双丹口服液进行预防给药，并与阳性药物碳酸钙维D比较。实验结束后，取大鼠右侧股骨进行骨生物力学检测，随后检测骨钙、磷、镁和羟脯氨酸含量。结果环磷酰胺明显导致大鼠股骨的骨有机质与矿物质丢失，生物力学性能下降，双丹口服液可有效地拮抗这些作用.freelide and investigate the preventive effects of Shuangdan oral liquid on rats.MethodsCyclophosphamide at the dose of 4.5 mg·kg-1·d-1 and vitamin D3 ide-treated rats orally. At the experiment, bone biomechanics analysis of the right femur ed in fresh sections. Then the hydroxyproline, Ca, P, Mg of bone echanics property and bone mineral on femur of rats decreased significantly.ConclusionShuangdan oral liquid can prevent osteopathologic change from cyclophosphamide-induced on rats. Key ide; Calcium and vitamin D3; Rats; Bone mineral; Bone biomechanics 双丹口服液记载于2005版《中国药典》，由丹参和牡丹皮两味中药组成，是著名的中药方剂。已有报道双丹口服液具有清除氧自由基，改善血流循环，增强免疫，以及抗炎、抗肿瘤等作用。其有效成分包括丹参素、丹参酮、丹皮酚、芍药苷等，本课题组曾报道丹参素能提高成骨细胞的活性，防治糖皮质激素大鼠所致的骨质疏松［1］，还报道了环磷酰胺可导致大鼠和小鼠产生骨质疏松毒性［2，3］，发现环磷酰胺有抑制成骨细胞活性而导致骨丢失的作用，对骨的影响皆类似于老年型骨质疏松的病理改变。本实验观察双丹口服液对环磷酰胺介导的骨质疏松大鼠股骨的影响，并与阳性药物碳酸钙维D进行比较。现报道如下。 1 材料与方法 1.1 药品与试剂 1.1.1 药品 丹参、牡丹皮等中药材购自本地药房，产地为四川。环磷酰胺：江苏恒瑞医药股份有限公司，批号：403501。碳酸钙维D片：美国安士制药公司，批号：5B16656，每片相当于钙300mg,VitD100单位。 1.1.2 试剂 丹参素标准品：中国药品生物制品检定所，批号110855-200304；甲醇（色谱纯，天津四友化学试剂公司）；水为三蒸水；冰醋酸（分析纯，汕头陇西化工厂）；羟脯氨酸试剂盒（碱水解法，南京建成生物技术有限公司）。 1.2 仪器 AE240电子天平(梅特勒-托利多仪器公司上海分公司生产)，高效液相色谱仪：Agilent1100系列四元梯度泵、Agilent1100手动进样器, Agilent1100系列一极管阵列检测器, Agilent1100工作站( Agilent公司);超声波清洗器，858 Mini Bionix 型材料测试系统（MTS,USA）；电感偶合等离子体发射光谱仪（ICP,美国TJA公司）；UV-752紫外分光光度计（上海第三医学仪器厂）。 1.3 方法 1.3.1 药物制备双丹口服液的制备工艺：参照2005年版《中国药典》的方法提取，取丹参600 g，牡丹皮300 g，牡丹皮蒸馏，收集蒸馏液。药渣和丹参加水煎煮两次，第1次2 h，第2次1 h，合并煎液，滤过，滤液浓缩至相对密度1.15的清膏，加乙醇使含醇量达60%，冷藏24 h，滤过，滤液回收乙醇至相对密度1.15的清膏，加入牡丹皮蒸馏液，最后将提取液浓缩至每100 ml含生药191.7 g，密封消毒,4℃冰箱保存备用。 双丹口服液的质量控制：双丹口服液的指纹图谱用高效液相法检测，色谱柱：Agilient C18（250 mm×4.65 mm，5 μm）;流动相：甲醇(A)－1％冰醋酸（B）,程序梯度洗脱：10%A(5 min)-30%A(15min)；流速：1ml/min；温度为室温；检测波长：280 nm。精密称取0.104，0.208，0.312，0.520，0.624，0.728 mg的丹参素钠标准品用三蒸水定容至5 ml，分别精密吸取上述对照品20 μl注入