哮喘豚鼠肺组织Eotaxin基因表达与嗜酸粒细胞活化相关论文.docVIP

　　哮喘豚鼠肺组织Eotaxin基因表达与嗜酸粒细胞活化相关论文 .freelRNA的表达;将二者行相关性分析. 结果 与地塞米松治疗组、正常对照组相比较，哮喘组豚鼠肺组织中ECP细胞（172±44） mm-2 与eotaxin mRNA（196±57） mm-2 表达明显增强（P 0.001），Eos活化增多;且二者呈正相关性（r=0.7447，P=0.0135）;糖皮质激素对Eotaxin mRNA（20±14） mm-2 ，ECP（26±19） mm-2 表达有显著的抑制作用. 结论 哮喘豚鼠肺组织中Eotaxin表达增强，Eos活化增多.糖皮质激素能抑制Eotaxin表达及Eos活化. Keya;eosinophil;eotaxin;eosinophil cation protein Abstract:AIM To study the relationship betatic guinea pigs，and to study the essential function of corticosteroid in them.METHODS Thirty guinea pigs a.freelethasone，nomal control）.Ovalbumin（Ova）sensitized and challenged guinea pigs odel of asthma.The pathologic sam-ples of lung tissue atic airucosa muno-histochemistry（IHC），and the expression of eotaxin mRNA in guinea lung tissue ethasone and normal control groups，ECP cells（172±44） mm-2 and eotaxin mRNA（196±57） mm-2 atic guinea pig，and the activated eosinophils increased（P 0.001）.The expression of eotaxin mRNA positively correlated inently inhibited the expression of eotaxin mRNA（20±14） mm-2 and ECP（26±19） mm-2 .CONCLUSION The expression of eotax-in gene and the activated eosinophils increased in lung tissue of asthmatic guinea pigs，i-nently doa公司;ECP mAb EG2:Pharmacia公司;SABC免疫组化试剂盒:武汉Boster公司;Eotaxin寡核苷酸探针序列:5′CAG TCG CTG AAA GGA GAT CTT CTT ATT GGT CAC ACG AAA GCA GCA GGC AC3′，根据Genebank中登录的Eotaxin（Accession U18941），由Oligo5软件设计，大连TaKaRa公司合成并在5′末端用地高辛标记;敏感性加强型原位杂交检测试剂盒II:武汉Boster公司;图像分析仪:Photodetecter ARGUS50型，滨松Pho-tonix公司. 1.2 方法 1.2.1 建立哮喘动物模型 将哮喘组、DXM治疗组豚鼠腹腔内均注入100g L-1 Ova1mL，致敏，制备豚鼠哮喘动物模型，对照组腹腔内注入等量生理盐水.哮喘组致敏后14d，吸入雾化的10g L-1 Ova诱喘，1次 d-1 ，连续5d.DXM治疗组每次诱发前2h腹腔内注入地塞米松0.5mg kg -1 ，余同哮喘组.对照组豚鼠每日给予生理盐水雾化吸入1次，吸入时间为同批哮喘组诱喘的最长时间.实验豚鼠给予3.5mL kg-1 水合氯醛腹腔麻醉后，剖开胸腔，切开左心房，将穿刺针刺入右心室及肺动脉干，固定后快速滴入4℃生理盐水100mL冲洗干净血液，取40g L-1 多聚甲醛500mL，快速滴注100mL，剩余液体缓慢滴注至肺组织完全变白为止.取出肺组织，用灭菌手术刀将肺组织按与气道横断面垂直方向修剪成1～2mm厚度的组织片，放置于4℃的40g L-1 多聚甲醛中继续固定12～24h后，进行脱水、透明、包埋、切片及HE染色. 1.2.2 检测ECP阳性表达 免疫组织化学参照武汉Boster公司SABC免疫组化试剂盒说明书.切片脱蜡至水，以30mL L-1 H2 O2 ，室温处理5～10min，双蒸水洗3次×2min，滴加复合消化液5～10min，双蒸水