甘油脱水酶再激活因子提高重组大肠杆菌3_羟基丙酸合成能力.pdfVIP

中国生物工程杂志 China Biotechnology ，20 11，31 (6):75-80 甘油脱水酶再激活因子提高重组大肠杆菌 * 3- 羟基丙酸合成能力 权国燕1，2 方慧英1，2 ＊＊ 诸葛斌1，2 ＊＊ 张 波1，2 姚佳佳1，2 诸葛健1，3 (1 江南大学生物工程学院工业微生物研究中心 无锡 214 122) (2 江南大学工业生物技术教育部重点实验室 无锡 214 122) (3 江南大学食品科学与技术国家重点实验室 无锡 214 122) 3 － ， 摘要 甘油脱水酶是甘油转化 羟基丙酸生物合成途径中的关键性限速酶 然而底物甘油的存 ， 3 － 。 在会抑制该酶的活性 从而引起 羟基丙酸合成量的下降 因此解除底物甘油对甘油脱水酶活 ， 3 － 。 性的抑制作用 是提高生物合成 羟基丙酸产量的方法之一 克隆来源于克雷伯氏菌 (Klebsiella p neumoniae) dhaB 、 gdrA 、 的甘油脱水酶编码基因 甘油脱水酶再激活因子编码基因 gdrB ， (Saccharomyces cerevisiae W303) aldH ， 以及来源于酿酒酵母 的乙醛脱氢酶编码基因 分别构 建了基因工程菌Escherichia coli JM109 / pEtac-dhaB-tac-aldH 和E． coli JM109 / pEtac-dhaB-gdrAB- tac-aldH ， 3 － 。 28 考察甘油脱水酶再激活因子对 羟基丙酸生物合成的影响 在好氧条件下发酵 小 时，E． coli JM109 / pEtac-dhaB-gdrAB-tac-aldH 与E． coli JM109 / pEtac-dhaB-tac-aldH3 － 羟基丙酸 4. 0 g / L 0. 54 g / L ， ，3 － 6. 4 。 合成量分别为 和 前者与后者相比 羟基丙酸合成量提高了 倍 研究结 ， 3 － 果表明 甘油脱水酶再激活因子能有效激活甘油脱水酶的活性从而提高了目标产物 羟基丙酸 的生物合成量。 关键词 甘油 重组大肠杆菌 3 － 羟基丙酸 甘油脱水酶 甘油脱水酶再激活因子 中图分类号 Q819 3 － (3-hydroxypropionic acid ， 3-HP) 。 羟基丙酸 简称 青睐 ， 3-HP 是一种重要的化工原料 在合成新型生物可降解性聚 基于系统代谢工程手段构建产 基因工程菌 、