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第$; 卷 分析化学 （1-7U0 3VTUV- ） 研究报告 第: 期 #%% 年: 月 ,4?BJFJ W8GOB@ 8D TB@AM?L@ ,4J=?FMOA :5 S :$ !!!!!!! ! ! 研 究报 告 ! ! !!!!!!! 芯片毛细管电泳评估脂质体介导超氧化物 歧化酶减低细胞内氧化应激 ! ! # # 孙 悦 殷学锋 卢 敏 ! # （浙江大学化学系微分析系统研究所 ，生命科学学院生物大分子与酶工程研究所 ，杭州$!%%# ） 摘 要 超氧化物歧化酶（’() ）可用作抗氧化的药物。它能催化并清除细胞内的活性氧组分（*(’ ），保护细 胞免受自由基的氧化破坏。但是由于’() 分子量较大，难以透过细胞膜进入细胞内，显著降低了’() 的药 效。本研究用激光共聚焦荧光显微镜拍摄的荧光图像说明，纳米脂质体可介导’() 进入细胞。用芯片毛细 管电泳激光诱导荧光分析法（+,-./01 ）测定单细胞中*(’ 和谷胱甘肽（2’3 ）的荧光信号强度，评估了用脂 质体包裹的’() 与细胞作用的抗氧化效果。用脂质体包裹的’() 与肝癌细胞共培养# 4 ，与直接用’() 作 用于肝癌细胞相比较，细胞内*(’ 明显降低，2’3 明显提高。实验结果说明，用脂质体包裹’() 是一种减低 细胞内氧化应激的有效给药途径。 氧化应激 关键词 超氧化物歧化酶，脂质体，单细胞， ! 引 言 在正常状态下，人体内氧化因子和抗氧化因子间处于平衡状态。在代谢过程中，如细胞不能完全清 除体内的自由基即可产生氧化应激（8C?KM?NJ FMOJFF ）。细胞内活性氧（*(’ ）和谷胱甘肽（2’3 ）含量是 ［!］ 表征氧化应激高低的重要指标 。 由于紫外线照射、药物、有毒食物和各种工业污染，使细胞内*(’ 升高。*(’ 包括氢氧自由基 （·(3 P ）、超氧自由基（·( P ）、过氧羟自由基（·3( ·）和过氧化氢 （3 ( ）等组分。*(’ 过高会产 # # # # 生氧化应激，引起细胞的氧化损伤、凋亡，引发各种自由基疾病并导致衰老［!］。*(’ 检测方法有顺磁共 ［# ］ ［$ ］ ［: ］ 振法 、化学发光法 和荧光分光光度法 等。但是由于细胞内*(’ 具有很高的活性，其含量与细胞 ［; ］ 内的生物环境和Q3 有关。因此，用这些方法不能得到准确的分析结果 。 2’3 是细胞内主要的含有硫醇基的化合物，它具有强还原性，用于保护细胞内含硫醇的蛋白免遭 *(’ 的氧化。在自由基引发的生理伤害发生时，*(’ 的含量升高，2’3 的含量降低［5 ］。2’3 可用酶比 ［ ］ ［6 ］ ［ ］ 色法 、3R/, 和,- 等方法检测。 超氧化物歧化酶（’() ）是一种广泛存在于生物体内的金属蛋白，它能