第3篇 同位素示踪技术.ppt

过程 固样 (＜100 μg N) +CuO+CaO 液样(派勒斯管) 放电管(?18×150) 抽真空 焙烧(马福炉) ? 15Ｎ丰度的质谱测定 原理 N2 按( )偏转分离 15Ｎ丰度的质谱测定 离子经加速电位VD后的动 能: 进入一垂直磁场后，在 劳伦兹力作用下做圆周运 动。 ? 以上两式消去速度v得: 质谱原理图 15Ｎ丰度的质谱测定 分析公式: 因此，固定R和B，通过改变 VD (电压扫描)，就可在得到 质谱图。 MAT261 15Ｎ丰度的质谱测定 测定分析 N2分子构成概率，设原子是 14N的概率为p ,是15N的为 q，则有: 15N丰度测定 当a＜5%， 选28和29峰分析，定义： 显然 于是 测定分析 若a很高，采用 丰度适中时， 样品分析的计量关系 样品中的氮来自标记氮源的百分比,可由同位素稀释原理求出。据同位素稀释定理有： 式中：Ns 、Nf —植物中来自土壤及肥料的氮素,ap、af —植物及肥料样品的15N原子百分超。 由上式，植物N素来自肥料的百分比： * * * * * * * * * * * 示踪剂的准备 开瓶分装 对商业制剂进行必要稀释和转化的操作。 工作程序  1.核查包装说 例 　磷—32标记磷酸氢钠制剂 1)标记化合物名称 Na２Ｈ３２ＰＯ4 2)物理化学状态 溶液，无色透 明 3)溶液体积 5 mci/ml 4)比活度 0.5 mci/mmol 5)放射性总活度 2.5 mci 6)放射化学纯度 100% 7)测定日期 2000.3.12 8)包装情况 安培瓶盛装，再置 铝罐内。 2.确定稀释倍数 浓度稀释关系 S0V0 =S1V1 式中，S0、S1和V0、V1分别为稀释 前后制剂的放射性浓(μci/ml)， 及体积。 ?比活度稀释关系: a0m0=a1(m0+m1) 式中，a0、a1分别为标记化合物稀 释前后的比活度，m0和m1为标记化 合的质量和所加稳定性同位素载 体的质量。 示踪剂的准备 3.开瓶分装操作 采用屏蔽和时间防护等措施，妥善处理废物。 4.使用前测定活度及放化纯度，必要时应纯化。 示踪剂的引入 植物体 根部 水培、沙培、土培。 地上部 涂抹法、注射法、点滴法。 动物体 注射法、涂布渗入法、吸入法。 示踪剂引入系统示例 1．Jim Rasmussen, el at, 2007. Soil Biology ＆ Biochemistry 39,804-815. 研究目的：套种体系碳、氮的转移、沉积和淋溶动态。 实验布置：田间微区，插入PVC柱，内径30cm。 示踪剂：14C-尿素，15N-尿素。 标记方法：叶缘吸收。植物叶片插入到盛有示踪液的小管，小管由布拉膜密封，持续标记5天。14C-尿素标记用2ml管,盛1ml标记液，活度7.7×106dpm(3.5?Ci); 15N-尿素用5ml管,盛2ml 0.75%(w/v) 丰度为99%的15N-尿素标记液。在整个生育期14C标记重复3次，15N标记重复5次。 2. Jessica L.Butler, el at,2004. Soil Biology ＆ Biochemistry 36,371-382. 研究目的：新固定的光合作用产物在植物根际的分布与周转。 实验布置：盆栽。 示踪剂：13CO2. 标记方法：整株饲喂。盆栽植物移入气密的透明有机玻璃光合室进行标记，光合室长×宽×高为40.5×40.5×58.5cm3,每次标记11个盆。13CO2在光合室直接发生,标记开始时监测光合室CO2的浓度约为200ppm(v/v)，滴入1.5ml 1.5M乳酸到盛有含22.4mg NaH13CO3(13C丰度为99%),此时光合室CO2的浓度大约升到约600ppm,待CO2的浓度降到200ppm，再在另一个含22.4mgNaH13CO3管中发生13CO2,此时CO2升至400ppm,待其再次降到200ppm，将标记盆移走，放入另一光合室内一段时间，以便使呼出的13CO2被固定，使标记最