纳豆激酶制剂及活性测定方法的研究.pdfVIP

摘 要 摘 要 本论文对纳豆激酶制剂的发酵生产条件及纳豆激酶制剂产品的基本酶学性质进行 I 了研究，并对纳豆激酶活力测定的多种方法进行了研究。 ● 以9号纳豆菌为出发菌株，在最佳摇瓶培养条件基础上通过5L发酵罐扩大培养， ’ 确定最优发酵培养条件，发酵液采用真空冷冻干燥得到纤溶活性较高的纳豆激酶干粉， 并对纳豆激酶干粉的部分酶学性质进行了研究。 试验结果表明：纳豆菌液体发酵罐产酶的最佳培养条件为，温度30℃，装液量2L／5L 纳豆激酶千粉基本酶学性质试验结果表明：50℃时，酶活还比较稳定，可保存80％ 左右的活力，随温度升高，纳豆激酶热稳定性变差，70℃的情况下20min酶全部失活； 对纳豆激酶活力起较弱抑制作用；低浓度Mn2+对纳豆激酶有促进作用。 五种纳豆激酶活力测定方法研究结果表明： CLT法受样品稀释倍数影响较大，不 同稀释倍数下测得的活力值误差可达43．0％1琼脂糖一纤维蛋白平板法所得数值不同稀释 倍数间差异并不大，误差为6．9％，较CLT法稳定、可靠；枯草杆菌蛋白酶活力测定方 法所得数据重现性较好，误差5．7％，与平板法所得数据线性相关，该测定方法的深入研 究具有很大意义；四肽底物法灵敏度高、精密度好，易于自动化，但检测成本昂贵，不 利于推广使用。纤溶活力测定法被日本保健食品协会指定为纳豆激酶活力测定标准方 法，但其实验操作复杂，测定结果不能单一表达纳豆激酶活力。 卜 关键词；纳豆激酶；真空冷冻干燥；活力测定方法 ^ Abstract In this conditionsofNattokinasefermented thesis，theproducing Preparationby subtilis charactersof also nattowere thebasic the were studied，then product I mensurationsofNattokinasewerestudiedanddiscussed． Meanwhileseveral activity the ● Natto-9wasselectedasthesource．Basedon resultsofshakeflask ▲ BacillusnattoWascultivatedwith5-1itmferment bestconditionsoffermentwere jar．The confirmed．TheNattokinasewasreceivedvia fibrinolytic powder freeze-drying． been factor conditionsto Havingoptimizedbysingle experiments，thetechnological Nattokinasefermentwer