结核分枝杆菌MPT83重组腺病毒载体的构建及表达.pdfVIP

1310 Y18 1 目 录 摘要………………：………………………………………………………．．I ABSTRACT…………………………………………………………………III 第1章文献综述……………………………………………………………l 1．1结核病的发病机理…………………………………………………l 1．2机体抗结核分枝杆菌感染的机制…………………………………l 1．3结核病疫苗……………………………………………………………4 1．4腺病毒载体构建综述………………………………………………8 0 第2章引言…………………………………………………………………1 2．1研究的背景…………………………………………………………l0 2．2研究的目的与意义…………………………………………………l0 第3章材料与方法…………………………………………………………l2 2 3．1材料、试剂、实验仪器…………………………………………l 3．2方法…………………………………………………………………l5 第4章结果与分析…………………………………………………………28 4．1结核分枝杆菌H37Rv基因组DNA的提取与定量………………28 4．2重组穿梭质粒的构建与鉴定………………………………………28 4．3重组腺病毒的构建及其鉴定………………………………………29 4．4重组腺病毒质粒转染HEK293细胞………………………………3l 4．5病毒扩增和滴度测定………………………………………………31 4．6 l mRNA水平上检测目的基因表达…………………………………3 4．7蛋白水平上检测目的基因表达……………………………………33 4．8体外淋巴细胞增殖…………………………………………………33 4．9活体荧光成像………………………………………………………35 第5章讨论…………………………………………………………………36 第6章结论与展望…………………………………………………………38 6．1结j沦…………………………………………………………………38 6．2展望…………………………………………………………………38 参考文献…………………………………………………………………39 附录………………………………………………………………………45 致谢………………………………………………………………………46 发表论文及参加课题……………………………………………………47 两南人’7-硕十学何论文 摘璎 结核分枝杆菌MPT83重组腺病毒载体 的构建及表达 遗传学硕士研究生： 陈水木 指导教师： 邓洪平副教授何秀云副研究员 摘 要 结核病(Tuberculosis,TB)是由结核分枝杆菌(Mycobacteriumtuberculosis，MTa)感染引起 的慢性传染病，MTB可能侵入人体全身各种器官，但主要侵犯肺，称为肺结核。据世界卫生 组织(wHo)统计，全世界每年有1000万新发病例，150万人死于结核病。我国高居全球结核 病高负担国家的第二位，现有MTB感染人数已达4亿，传染性TB患者达到200万。卡介苗(BCG) 作为目前唯一用于预防结核病的疫苗，对于儿童重症结核病如粟粒型结核和结核性脑膜炎具 有预防作用，但是对于预防成年人结核病效果不理想，保护率