UltraECL底物化学发光检测试剂盒说明书.pdfVIP

◆ UltraECL底物化学发光检测试剂盒 ◆ 目录号1924 ◆ 使用手册 ◆ 实验室使用，仅用于体外 UltraECL 底物化学发光检测试剂盒 目录号：1924 目录编号 包装单位 50ml 192401 （A 液B 液各25ml） 100ml 192402 （A 液B 液各 50ml） 500ml 192403 （A 液B 液各250ml）  试剂盒组成、储存、稳定性： 试剂盒组成 保存 50ml 100ml 500ml 溶液 A 4℃避光 25 ml 50 ml 250 ml 溶液 B 4℃避光 25 ml 50 ml 250 ml 本产品收到后按照上面指示温度存放，至少6 个月内有效。 - 1 -  产品介绍： Western blot 底物发光检测试剂可由标记于二抗上的辣根过氧化酶催化，产生化学 发光反应，可以灵敏地检测出目的蛋白的存在。UltraECL 底物化学发光检测试剂盒基 于新一代增强型化学发光底物研制而成，并对成份做了优化。产品背景低，稳定性好， 比普通ECL 试剂敏感度高数十倍。它由辣根过氧化物酶(HRP)催化发生化学反应，发 出荧光，可对X 光胶片曝光，也可直接进行luminometer 检测或者荧光CCD 扫描。  操作步骤： 1. 按常规Western blot 操作，二抗孵育后，进行最后一次洗涤时，根据膜的大小，按 2 每10cm 膜混合0.5ml溶液A和0.5ml溶液B ，混匀，配制成发光检测工作液。 2. 用平头镊子将膜取出，膜的下缘轻轻接触吸水纸，以去除膜上多余的液体。膜的 蛋白面朝上，置于洁净保鲜膜（某些市售保鲜膜包裹印迹膜时可能会淬灭荧光， 应选择高质量保鲜膜）上。用吸管将配制的发光检测液转移到蛋白膜上，使其均 匀覆盖，室温孵育1-2分钟。 3. 用平头镊夹持蛋白膜，膜的下缘轻轻接触吸水纸，以去除膜上多余的液体。膜的 蛋白面朝上，包裹于洁净保鲜膜内。轻轻赶出其间的气泡，固定在X 片暗盒内。 4. 在暗室中取一张X 片置于包裹的膜上，合上暗盒，曝光30秒至1分钟。立即显影定 影，根据其曝光强度，缩短或延长下一张X 片的曝光时间（对微弱信号，曝光时 间可延长至数小时）,或者曝光0.5， 1，2 ，4 ，6分钟一系列后再显影定影挑选一 张满意的。也可用合适的照相器材直接记录蛋白膜的化学发光图像。 注意：如果储存使用时间过长，溶液B 中过氧化氢可能随时间分解降低曝光敏感 度，可取普通纯水按照每 10ml 纯水加入 40µl 30 ％H 0 （商品化的H 0 一般为 2 2 2 2 30 ％）比例配成新鲜H 0 溶液替代溶液B 使用，可以完全恢复发光工作液最大发 2 2 光敏感度，效果和新鲜的溶液B 完全一样。 - 2 -