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2012年 12月 山东 师 范 大 学 学 报 (自然 科 学 版) Dec．20l2 第27卷 第4期 JournalofShandongNormalUniversity(NaturalScience) Vo1．27No．4 常见植物组织作为药用或化妆品用 SOD来源的价值 孙旭璐 徐晓露 张乃博 (山东大学生命科学学院，250100，济南 ) 摘要 通过对天然植物(菠菜和黄瓜)超氧化物歧化酶(SOD)的提取并用氮蓝四唑(NBT)法活力测定，以相同条件下处理的 含SOD的医药产品(如大宝SOD蜜)作对照．实验采用氯化硝基四氮唑蓝 (NBT)为显色剂，以酶标法测定SOD对其变色反应的抑 制作用，以抑制率来反映酶活力强弱．结果表明：菠菜叶SOD活力较高，大宝 SOD蜜中SOD活力在多数情况下与同质量的菠菜叶 比略偏低，黄瓜果肉中SOD活力最低，菠菜叶具有较 良好的抗氧化效果，所以可能作为药用或化妆品用 SOD来源． 关键词 超氧化物歧化酶(SOD)；氯化硝基四氮唑蓝(NBT)；酶活力 中图分类号 Q51 文献标识码 A d0i：10．3969／j．issn．1001—4748．2012．04．034 1 前 言 体内活性氧类自由基作为强氧化性致衰老因子，是危害肌肤健康的主要元凶之一．作为抗衰老物质的主要功能成分，超 氧化物歧化酶(SOD)在现今许多具有抗氧化、抗衰老的药品、护肤品中都有添加，因为它可能通过消除自由基 、逆转组织的纤 维化而实现延缓皮肤衰老…．动物细胞(如血细胞)曾经是提取SOD的主要来源 ]，但这一来源由于病毒、细菌等的污染可能 存在安全隐患，对人的健康造成伤害．而植物细胞的细胞壁往往形成对病毒、细菌的天然屏障，若能从 中提取出高活力 的 SOD，则可作为更加安全可靠的SOD来源，具有极高的药用价值．近年来已有关于从绿色植物细胞中提取 SOD的报告 ，证 明这一假设的可行性． 超氧化物歧化酶(SOD)是生物体细胞内重要的抗氧化屏障，可以催化细胞代谢产生的超氧化物发生歧化反应： M ‘ 一SOD + 0 —}M 一SOD +O2 M 一SOD +02-+2H M( 一SOD+H2O2 ． 式中：M =Cu(n=1)；Mn(n=2)；Fe(n：2)；Ni(n=2) 通过光谱法表征0 的量，获得SOD对氧化反应的抑制效果．光谱法基于0 与显色剂氮蓝四唑(NBT)的反应，超氧阴离 子自由基可将 NBT还原为蓝色的甲臌 ，甲臌在400—500nm处有最大吸收．因此在光还原反应中，若加入SOD，可以抑制0 的生成 ，从而降低产物溶液的吸光度 (OD)值．一定范围内，SOD活性越高，产物OD值越低 ．若将未加SOD的反应体系最终 OD值An作为参照，加入SOD的反应体系的最终OD值为A，定义SOD的抑制率为： 抑制率=(A，一A。) 。 制作抑制率关于酶活的标准曲线，由标准曲线获得抑制率50％时的酶活定 100 义为一个活力单位，通过测定未知样品的OD值，计算出其抑制率，得到其酶活 ； 单位数，用于表观样品酶活力．NBT法的最大缺点是即使加入过量的SOD也不 70 能获得100％的抑制率，原因是NBT反应的特异性有限，会与黄嘌呤氧化酶直接 量 反应生成有色物质． 耋40 XTI和WST一1是具有磺酸基团单四唑盐，与NBT作用原理类似，随着 ； SOD浓度的上升，可以观察到 1