PRKCD和ASK1在人髓系白血病U937细胞分化过程中的作用.PDF

J South Med Univ, 2015, 35(1): 17-22 doi 10.3969/j.issn. 1673-4254.2015.01.04 ·17 · 基础研究 PRKCDPRKCD 和和ASKASK11在人髓系白血病在人髓系白血病UU937937 细胞分化过程中的作用细胞分化过程中的作用 1 2 1 1 3 闫 峰 ，王效民 ，袁思波 ，马全明 ，韩慧平 1 2 厦门大学附属中山医院 胃肠外科//厦门市消化疾病诊治中心//厦门大学消化病研究所，肝胆外科，福建 厦门 3 361004 ， 杭州赫贝科技有限公司，浙江 杭州 311111 摘要：目的 通过检测ASK 1和PRKCD 在单核细胞分化过程中的表达变化，探索其在门静脉高压症(PH)脾亢脾脏巨噬细胞 （MΦ）功能变化中所起的作用。方法 采用佛波酯诱导U937 分化成为巨噬细胞样细胞，q-PCR 检测不同分化阶段ASK 1 和 PRKCD mRNA 的表达，Western Blot 检测诱导前后ASK 1和PRKCD 蛋白表达水平变化，ELISA 法检测细胞分化过程中与吞噬 功能相关的细胞因子IL- 10和TNF-α的分泌情况，鸡红细胞吞噬试验鉴定诱导后细胞功能。结果 随着PMA 诱导U937 细胞时 间延长，ASK 1和PRKCD 基因表达水平下降，TNF-α的分泌量逐渐增加，而IL- 10在诱导后24 h 达到最大分泌量，随后又呈下降 趋势；Western Blot 结果显示，ASK 1及p-ASK 1蛋白表达水平较诱导前均显著上升，PRKCD 及p-PRKCD 蛋白表达水平显著下 降；吞噬实验结果显示，诱导后的细胞具有一定的吞噬功能。结论 在PMA 诱导的U937 细胞向单核细胞分化过程中，ASK 1蛋 白表达上调，PRKCD 蛋白表达下调，与脾亢脾Mφ一致，并导致Mφ活性增强。 关键词：单核细胞分化；U937 ；PRKCD ；ASK 1；门静脉高压症脾亢 Role of PRKCD and ASK1 in U937 cell differentiation 1 2 1 1 3 YAN Feng , WANG Xiaomin , YUAN Sibo , MA Quanming , HAN Huiping 1Department of Gastrointestinal Surgery, Zhongshan Hospital, Xiamen University; Xiamen University Digestive Diseases Institute; Digestive Diseases Center of Xiamen City; 2Department of Hepatobiliary Surgery, Xiamen, 361004, China; 3Hangzhou Hibio Biotechnology co., LTD, Hangzhou, 311111, China Abstract ：Objective To investigate the expression of ASK1 and PRKCD in the process of monocyte differentiation, and explore their role in functional changes of hypersplenism spleen macrophages (MΦ) in portal hypertension (PH). Methods U937 cells were stimulated to differentiate into monocyte/macrophage-like cells by cultivation in PMA and the mRNA expressions of ASK1 and PRKCD were detected b