二阶导数紫外分光光度法测定面粉中的过氧化苯甲酰邓真丽1王龑龙2.doc

二阶导数紫外分光光度法测定面粉中的过氧化苯甲酰 邓真丽1 王龑龙2 李 栋2 方正东1 （1．湖北师范学院化学与环境工程系，黄石 435002； 2．湖北省黄石市产品质量监督检验所，黄石 435002） 摘要 用铁粉与盐酸反应产生的原子态氢将面粉中的过氧化苯甲酰还原成苯甲酸，用乙醚提取，采用二阶导数紫外分光光度法测定其含量，过氧化苯甲酰的检出限是1.0μg/mL，回收率为94～106％，其测量精密度优于国家标准GB/T5009-1996色谱法，与校正曲线相当。 关键词 过氧化苯甲酰 面粉 紫外分光光度法 随着我国对外经济贸易的发展，国产面粉逐渐走向国际市场。市售面粉大多数含有面粉增白剂——过氧化苯甲酰。过氧化苯甲酰是一种强氧化剂，长期食用添加过量过氧化苯甲酰的面粉易导致肝脏病变和慢性中毒。因此，有些国家禁止使用或限量使用增白剂，如英国允许面粉中过氧化苯甲酰的添加量不大于0.05g/kg。我国国家标准GB2760-1996规定小麦粉中过氧化苯甲酰的限量为0.06 g/kg。 目前，我国对面粉中过氧化苯甲酰的测定方法主要有气相色谱法和液相色谱法。[1]其中气相色谱法需反复地进行提取浓缩而大量消耗乙醚，操作复杂，实用性较差；而液相色谱法虽然操作简便、节省溶剂，但仪器过于昂贵，不利于推广。分光光度法用于测定面粉中残留的过氧化苯甲酰，其原理是利用面粉中的过氧化苯甲酰与KI反应生成I2，通过测定I2的吸光度，计算而得过氧化苯甲酰的含量。据文献[4]报道，加入面粉中81mg/kg的过氧化苯甲酰两周后，残留量就变成22mg/kg，仅为原添加量的27％，因此该方法只适用于新鲜面粉中过氧化苯甲酰的测定。笔者探讨了间接测定面粉中过氧化苯甲酰的含量的方法，即用铁粉与盐酸反应产生的原子态的氢将过氧化苯甲酰还原为苯甲酸，然后利用二阶导数紫外分光光度法测定苯甲酸的浓度，从而间接计算面粉中过氧化苯甲酰的添加量。本方法操作简便，乙醚用量少，容易推广。 1实验部分 1.1主要仪器和试剂 紫外分光光度计：TU-1900型，北京普析通用仪器有限公司； 电子分析天平：普及型B_N，梅特勒-托利多仪器有限公司； 具塞三角瓶；分液漏斗； 乙醚、盐酸、还原铁粉、NaCl、无水Na2SO4、NaOH：均为分析纯； 苯甲酸：基准试剂； 苯甲酸标准储备液：50μg/mL。准确称取0.0500g苯甲酸于1000mL容量瓶中，以0.01mol/LNaOH溶液溶解并定容。 实验用水为二次蒸馏水。 2系列苯甲酸溶液的制备 准确吸取50μg/mL苯甲酸标准储备液0、2、4、8mL于100mL具塞三角瓶中，分别加入0.01g铁粉、约20粒玻璃珠（Φ6mm左右）和50mL乙醚，混匀，逐滴加入2mL盐酸溶液（1＋1），回旋摇动，放置12h以上。将上述放置后的溶液过滤于150mL分液漏斗中，静置后放出下层水溶液，加入30mL饱和NaCl溶液，振摇5min，静置后使溶液分层，放出水层后，加入适量无水Na2SO4，振摇脱水，以0.01mol/LNaOH溶液溶解并定容至50.0mL，分别制得0、2、4、8μg/mL苯甲酸标准溶液。 1.3样品溶液的制备 准确称取3g左右的面粉于100 mL碘量瓶中，加入20粒玻璃珠和50mL乙醚，振荡使面粉溶解，再加入还原铁粉0.01g和3mL盐酸溶液（1＋1），振摇片刻后，静置12h以上。 1.4实验方法 用紫外分光光度计在200-300nm区域扫描测到苯甲酸光谱图，对扫描的光谱图进行二阶求导，用两点垂直法进行定量。 2结果与讨论 2.1紫外光谱 图1是8μg/mL苯甲酸标准溶液的紫外光谱图。由图1可知，苯甲酸在紫外区段230nm处有单吸收峰，为消除面粉中色素及其它元素在此区间的吸收干扰，可对吸收光谱求导，通过不同阶次导数值和不同Δλ值对苯甲酸导数光谱的影响分析可知，一阶导数不能扫描出230nm处的特征吸收峰，三阶以上的导数光谱图因平滑作用而使吸收峰变小甚至为零，并显著降低了灵敏度。在Δλ分别为1、2、4、6、8、12、14nm时，以Δλ＝8nm时得到的分辨率为最好，干扰最少。图2是4μg/mL苯甲酸标准溶液的二阶导数光谱图。 由图2可知，毗邻苯甲酸特征峰230nm的235 nm、239nm峰的二阶导数值相等，故可用两点垂直法定量测定。 2.2线性方程 分别配置系列浓度的苯甲酸标准溶液，按实验方法测定，用二阶导数光度值D对溶液浓度c（mg/L）进行线性回归，得到线性方程： D=9.65×10-3c-3.07×10-4 相关系数γ＝0.9998 线性范围为0.1-4.0μg/mL 2.3干扰因素的考察 在本实验条件下，水和饱和饱和NaCl溶液不影响测定，而乙醚和FeCl2溶液均对测定产生干扰。因此