抗CD47抗体恢复吞噬作用和防止动脉粥样硬化 重点讲义.docxVIP

 PAGE \* MERGEFORMAT 14 抗-CD47抗体恢复吞噬作用和阻止动脉粥样硬化（全文，图表未译） Yoko kojima,Jens-Peter Volkmer,……,和Nicholas J.Leeper Nature(2016)? doi:10.1038/nature18935? Published online20 July 2016 qinglanhe?译 ??? 动脉粥样硬化，是形成心脏病发作和中风疾病过程的基础1。晚期病变存在的破裂风险，是以病变血管细胞和凋亡细胞残骸的病理性累积为特征的2。这些细胞未能被清除的原因，仍然未知3。在此，我们的研究表明，动脉粥样硬化是与CD47作用的上调有关的，CD47是一个关键的抗吞噬分子，已知它给予有害细胞抵抗程序性清除或‘胞葬作用’的能力4-7。我们发现，给予抗-CD47抗体，逆转了胞葬能力的不足，使清除病变血管组织能力趋于正常，并减轻了多个小鼠模型中的动脉粥样硬化。涉及到促进动脉粥样硬化因子TNF-α(肿瘤坏死因子-α)的机制研究,TNF-α是细胞程序性清除受损的根本驱动力，这可以解释血管疾病中的细胞清除过程为什么会受到削弱。类似于最近在癌症中的观察5，胞葬作用的受损似乎在心血管疾病中起着致病的作用，但这不是一个不可改变的缺陷，而预示着可能出现一个新的治疗靶标。 人体每天更换超过１０００亿个细胞8。为了防止与凋亡细胞残骸相关的后果发生9，这些细胞残骸通过称为程序性细胞清除或‘胞葬作用’的一种吞噬过程，被快速和有效地清除10。程序性细胞清除，是由巨噬细胞发现靶细胞表面上吞噬的‘吃我’信号介导的，而这种程序性清除又可被细胞表面表达的抗吞噬的‘不要吃我’信号例如CD47的表达所取消（参考文献６）。然而，程序性细胞清除是高度保守的，几乎在所有的组织中和全部的生理情况下都存在，这在动脉粥样硬化性心血管疾病中似乎受到了显著的损害，是引起世界上人死亡的首要原因11。动脉粥样硬化是以病变的巨噬细胞和血管平滑肌细胞（SMCs)的累积为特征的，这不仅侵占相关血管的内腔，而且也可能引起程序性细胞死亡1,12。由于巨噬细胞的病变引起清除病变细胞功能的受损，被认为可解释为什么往往可在动脉粥样硬化坏死核心中观察到这些细胞，并可能增强血管的炎症和斑块终于破碎的风险3,13,14。然而，这个缺陷的潜在机制仍然没有确定。 我们最近发现了关键的抗吞噬分子CD47，被多种癌症反常地上调5,7,15。这使恶性肿瘤细胞对经典的免疫监控机构例如杀肿瘤巨噬细胞具有抵抗力，而这现在已被公认为是一个肿瘤生长的基本驱动力。为了确定调节异常的CD47也可能导致动脉粥样硬化的形成，我们评估了在两个独立的人血管组织样本库中它的表达16,17。我们发现，人动脉粥样硬化斑块与无动脉粥样硬化的血管组织相比(图.1a),以及具有症状性血管疾病的患者（中风或短暂造血性发作）与那些稳定无症状病变者相比，CD47被恒定地上调（扩展数据图.1a)。因为一些胞葬作用分子已知在经过了翻译后的修饰18，我们还对人的冠状动脉和颈动脉进行了免疫荧光和免疫组化染色，确认在动脉粥样硬化形成期间，CD47被渐进性地上调，并强烈地集中出现于坏死核心（图.１b,扩展的数据图.１b-g)。于动脉粥样硬化的小鼠模型和其他公开可用的微阵列数据集中观察到了类似的结果（图.１c,d,扩展的数据图.２）。总之，这些数据表明，‘不要吃我’分子的病理性上调，可能解释为什么在人动脉粥样硬化斑块中的吞噬作用受到了损害，这可能促使此种病变与时俱进的扩展。 为了确定这个缺陷是否可以利用作为一个心血管疾病的转化靶标，我们用直接抗CD47的一种抑制抗体，处理了一组有动脉粥样硬化趋势的小鼠（植入血管紧张素Ⅱ微型灌注泵19的载脂蛋白Ｅ缺陷（apoE-/-))(扩展数据图.３a)15.。与IgG对照相比，抗-Cd47抗体处理，使主动脉窦和主动脉内表面中有关的动脉粥样硬化显著地减少（图.２a,b,扩展数据图.３b,c)。在几个外加模型中，观察到了类似的结果，像在临床会遇到的那样，包括慢性动脉粥样硬化、脆弱性斑块和形成病变的小鼠模型（扩展数据图.３d-h)。虽然，抗-CD47抗体对体外细胞凋亡没有影响（图.２c,扩展数据图.4a,b),不过，我们在抗-CD47处理动物体内的病变中观察到凋亡体显著地更少（图.２d)。为了解决这种差异，我们应用构建的体外吞噬试验，发现抗-Cd47抗体，强有力地诱导了暴露于模拟动脉粥样硬化环境中氧化磷脂质中的病变和凋亡的血管平滑肌细胞和巨噬细胞的清除（图.２e,扩展数据图.４c-f)。同样地，与斑块内巨噬细胞无关的‘游离’凋亡体的数量，在体内以抗-CD47抗体处理后减少，如共定位（图.２f,扩展数据图.５a)和电子显微镜（图.2g,扩展数据图.５b)研究所表明