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草莓种苗脱毒快繁体系建立及温室层架栽培技术应用 　　（鄢陵建业绿色基地建设有限公司，河南许昌 461000） 莓，蔷薇科草莓属多年生草本植物，果实酸甜可口，营养丰富，富含糖、蛋白质、无机盐、维生素等多种营养物质，在世界小浆果生产中居于首位。长期以来，中国大多数地区都依靠传统的分株繁殖法生产草莓种苗，导致草莓体内病毒的不断累积，病毒病的发生逐年加重。利用草莓的脱毒、快繁技术进行草莓苗的规模化生产，既可以保持原品种的种质纯度，又可以提高草莓的繁殖系数，更重要的是可以提高草莓的产量和品质、促进草莓产业化发展。因此，草莓脱毒快繁体系（图1）的建立可对草莓苗的规模化生产奠定重要的技术基础 基于无土栽培营养液配方施肥基础上的温室内草莓层架栽培，既体现了农产品的高品质、高产量，也满足了人们日益增加的休闲观光生态采摘需求 草莓品种的选择 本试验选择3个草莓品种，分别是红颜太空2008玫瑰香等适合温室促成栽培的品种 红颜是日本草莓品种之一，其果实甜、硬、香，多级花序，结果期长，产量高；太空2008是由中国农业科学院培育生产，是中??太空自育种金奖品种，果实大，一般单果重20～40 g，最大果重89 g，果实硬度中等，果皮有韧性，果肉软硬适口，完熟后全果鲜红，采摘后储运期果色不变，果肉红色，果味甜酸，甜味突出；玫瑰香为河南郑州中牟地区广泛种植的品种，果实香味浓郁，果肉香甜（图2） 茎尖脱毒培养 本试验中草莓脱毒快繁所取外植体为匍匐茎顶端嫩芽。从温室中选取形状优良、生长健壮、无病虫危害的草莓母株，截取小叶尚未展开的匍匐茎顶端约2～3 cm长的顶芽。首先用0.2%洗洁精水溶液浸泡5 min，然后用软毛刷轻轻刷洗一遍，再用流动清水冲洗2 h，转入超净工作台中。在超净工作台中先用无菌的镊子将匍匐茎顶端外部的大叶摘除，然后用75%酒精快速灭菌30 s，用无菌水冲洗2遍后，再用0.1%升汞（滴入1～2滴吐温80）振荡灭菌6 min，最后用无菌水冲洗5遍。将清洗干净的匍匐茎顶芽用无菌滤纸擦去表面水分，在双筒解剖镜下逐层剥去幼叶，每剥一层换一只灭菌的解剖针，一直剥至可见叶原基和透明半圆球形的顶端分生组织，切取0.5 mm置于已灭菌的诱导培养基上 初代诱导分化培养在试管中进行，每管接种1个茎尖。茎尖在初代诱导培养基上培养10天左右颜色会逐渐转绿，基部开始膨大，培养约20天后可见小茎逐渐伸长，叶原基逐渐形成小叶，培养30天便可形成高2 cm左右的草莓幼苗 诱导培养基以MS培养基为基础培养基，附加不同浓度的6-BA、IBA。蔗糖含量为30 g/L，可用白砂糖代替蔗糖，琼脂含量5 g/L，灭菌前pH值调至5.8。接种后移至培养室内培养，培养条件为光照1500～2500 Lx，时间为12 h/天，温度24±2℃，相对湿度70%左右（培养条件下同），并及时观察记录。结果显示，激素浓度不同，茎尖成活率、诱导成活的幼苗大小、生长状态等都有一定的差异。当6-BA浓度0.5～2 mg/L、IBA浓度为0～0.3 mg/L，均能诱导出不定芽，其中以培养基MS+6-BA 1 mg/L+IBA 0.5 mg/L最为理想，不定芽的诱导率相对较高，且小苗长势良好，诱导出的不定芽也相对较多。此外，不定芽的诱导率与切取茎尖的大小有一定的关联性，茎尖越小成活率越低，但其脱毒效果会更好。本试验的3个品种初代诱导培养结果基本一致 试管苗快速繁殖 当诱导分化出的草莓苗高长至1.5～2 cm左右时，将其转接至经过灭菌的继代增殖培养基中，置于培养室内培养。培养容器为耐高温塑料培养瓶，每瓶可接种6～8株试管脱毒苗。继代增殖培养基以MS培养基为基础培养基，并附加不同浓度的6-BA和IBA，蔗糖含量为30 g/L。增殖培养过程中注意观察继代周期、增殖系数及植株生长状况 由表1可以看出，决定增殖系数的主要因素为6-BA。当6-BA含量升高，3个品种的平均增殖系数均逐渐升高，当6-BA值为0.3～0.5 mg/L时，草莓苗的增殖系数增加不明显。此外，在试验中发现，随着6-BA、IBA含量的升高，脱毒苗产生愈伤组织的频率增高，影响组培苗质量。因此，适合3个品种的增殖培养基可确定为MS+6-BA 0.3 mg/L+IBA 0.01 mg/L。增殖系数6倍左右，且不定芽长势健壮，产生的愈伤组织较少（图3） 生根培养 经过4～5代增殖培养后，将生长健壮的草莓组培苗转接到生根培养基上进行生根培养；生长较为弱小的草莓苗转至壮苗培养基上培养10天左右后再转至生根培养基上。材料接种后置于培养室中培养，注意及时观察组培苗的生根情况 壮苗培养基为MS培养基不添加任何激素。生根培养基为1/2 MS培养基附加不同浓度的IBA，蔗糖含量为20 g/L。结果表明IBA含量对3