糖类脂蛋白质检测.docVIP

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糖类脂蛋白质检测

还原糖(葡萄糖、麦芽糖、果糖) 脂肪 蛋白质 淀粉 实 验 材 料 含糖量高的生物组织或器官,颜色为白色或无色。 如:苹果或梨匀浆、白色甘蓝叶、白萝卜。 富含脂肪的种子 如:花生种子(浸泡3-4h)、花生种子匀浆 富含蛋白质的生物组织 如:豆浆、鲜肝提取液、鸡蛋清 富含淀粉的生物组织 如:马铃薯匀浆 实 验 原 理 还原糖与斐林试剂反应生成砖红色沉淀 (还原糖中游离的醛基或羰基将斐林试剂中的Cu2+还原成Cu2O沉淀。) 脂肪被苏丹Ⅲ染液染成橘黄色(或被苏丹Ⅳ染成红色)。 蛋白质与双缩脲试剂发生紫色反应,(双缩脲试剂中的Cu2+在碱性条件下与蛋白质中的肽键结合成紫色络合物) 淀粉遇碘变蓝 化学 试剂 斐林试剂 (或班氏试剂) 苏丹Ⅲ染液 (苏丹Ⅳ染液) 双缩脲试剂 碘液 实验 现象 砖红色沉淀 橘黄色(或红色)脂肪颗粒(显微镜下看到) 紫色 蓝色 斐林试剂 双缩脲试剂 组 成 甲液:0.1g/mL的NaOH溶液; 乙液:0.05g/mL的溶液。 A液:0.1g/mL的NaOH溶液; B液:0.01g/mL的溶液。 原理 甲液和乙液混合后产生沉淀,与含醛基(—CHO)或羰基的可溶性还原糖,在加热条件下反应,将还原为砖红色的沉淀。 在碱性溶液(NaOH)中,双缩脲()能与反应,形成紫色络合物。由于蛋白质分子中含有许多与双缩脲结构相似的肽键(—CO—NH—),因此,蛋白质都可以与双缩脲试剂发生反应而使溶液呈现紫色。 使用方法 现配现用、等量混合、水浴加热 现配现用,先向待测组织液中加1mLNaOH溶液形成碱性环境,再滴加少量溶液。 颜色变化 浅蓝色→棕色(混合色)→砖红色 无色→浅蓝色()→紫色。

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