八因子层析工艺立项建议填料与层析柱.doc

2007年10月 关于八因子项目的层析工艺立项提案（社外秘） 一、工艺路线 借鉴国内外成熟的层析纯化工艺经验，结合自身的研究开发。 人血浆八因子的主要工艺技术路线（推荐）： 1步层析工艺 + 2步病毒灭活 （其他步骤略） 说明：以下的提案内容仅涉及层析工艺部分的内容。 二、项目开发计划 1、前期准备工作 公司内部调研、公司外部调研、讨论该项目开发的必要性和可行性等 2、提案与立项 与供应商间进行交流、完成项目投资成本的初步估算； 八因子项目的研发提案、公司高层的研究决策； 八因子项目研发工作的正式立项 3、小试阶段 层析纯化介质、层析柱的选择； 层析纯化条件的优化； 层析纯化工艺的初步确立 注：拟使用层析纯化介质为Toyopearl DEAE-650M（日本TOSOH公司产品） 小试用预装柱柱尺寸：Toyopearl DEAE-650M PAK 22mmI.D.*20cmL （76mL·gel） 4、中试阶段 中试用层析柱的选择； 层析纯化条件的进一步优化；（载量、纯度、回收率等指标的确认） 批次重复/再现性试验； 层析工艺的确立 5、设备的引进、安装与调试 层析纯化介质使用量的讨论、决定及购买； 层析柱选用的讨论、决定及购买； 安装调试等 6、规模化试生产 7、工艺验证（纯化工艺、病毒灭活工艺等） 多方通力合作，完成八因子制备工艺的验证工作 8、报批 9、临床 …… 三、项目投资成本的初步估算（层析工艺部分） （一）、层析纯化介质部分 1、纯化介质的选用 产品：Toyopearl DEAE-650M（日本TOSOH公司） 纯化介质粒径分布范围：40-90微米 纯化介质孔径大小：1000埃 Toyopearl DEAE-650M填料的其他指标请参照产品说明书。 2、纯化介质使用量的算出 工艺路线一：从血浆直接制备八因子 回收率：根据进料量的不同，回收率会出现差异。经验表明，回收率一般在50-90%。（我们的目标为70%） 纯度：100-500 I.U./mg·八因子 前提假设1：0.5I.U.·八因子/mL·血浆 DEAE-650M的载量：50 I.U.·八因子/mL·DEAE-650M 每mL DEAE-650M的血浆处理量：100 mL·血浆/mL·DEAE-650M·批次 前提假定2：使用50L的DEAE-650M纯化介质 50L DEAE-650M的血浆处理量：5,000L·血浆/50L·DEAE-650M·批次 前提假定3：纯化介质在使用15-20个批次后进行更换 50L DEAE-650M使用15-20个批次后的血浆处理总量：75,000L-100,000L·血浆/50L·DEAE-650M·（15-20）批次 前提假设4：每L血浆重量为1Kg 50L DEAE-650M使用15-20个批次后的血浆处理总量：75-100吨·血浆/50L·DEAE-650M·（15-20）批次 结论：采用工艺路线一、并结合上述前提假定的情况下，当使用50L DEAE-650M填料进行八因子的纯化时，累计可处理75-100吨血浆原料。 工艺路线二：从冷沉淀（Cryoprecipitate）制备八因子 前提假设1：2-5 I.U.·八因子/mL·冷沉淀 前提假定2：每L DEAE-650M纯化介质可处理1-2Kg冷沉淀 前提假定3：每吨血浆可获得12-15Kg冷沉淀 前提假定4：纯化介质在使用30-50个批次后进行更换 结论1：每50L DEAE-650M纯化介质每个批次可处理50-100 Kg冷沉淀。换算成血浆，也就是说每50L DEAE-650M纯化介质每个批次可处理3.3-8.3吨血浆。那么，当纯化介质可使用30-50个批次时，可处理的血浆总量为99-415吨血浆。（调查结果表明：对于从冷沉淀出发制备八因子时，纯化介质的使用寿命要比从血浆出发直接制备八因子要长。从国外某些八因子生产厂家的经验来看，当使用DEAE-650M进行冷沉淀来源的八因子的制备时，纯化介质的使用寿命可以达到100-200个批次。当然，在成本考虑上，同时也需要注意从血浆到冷沉淀等工艺上的投资。） 结论2：每50L DEAE-650M纯化介质每个批次可获得105-5*105 I.U.的八因子。按照纯化介质可使用15-20个批次计算，共可获得1.5*106-107 I.U.的八因子。 3、层析工艺研究开发及试生产各阶段层析纯化介质使用量的方案 小试阶段：Toyopearl DEAE-650M PAK 22mmI.D.*20cmL （76mL·gel） TOSOH公司免费提供 中试阶段：Toyopearl DEAE-65