一种基于单交换原理的地衣芽孢杆菌基因敲除方法和应用.PDFVIP

中国生物工程杂志　ＣｈｉｎａＢｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，２０１６，３６（１１）：６３６９ ＤＯＩ：１０．１３５２３／ｊ．ｃｂ 一种基于单交换原理的地衣芽孢杆菌 基因敲除方法及应用 韩海红　汪俊卿　王腾飞　肖　静　韩登兰　王瑞明 （齐鲁工业大学生物工程学院　济南　２５０３５３） 摘要　目的：基于同源单交换原理构建地衣芽孢杆菌基因快速敲除方法，提高基因敲除效率。方 法：以地衣芽孢杆菌（Ｂａｃｉｌｌｕｓｌｉｃｈｅｎｉｆｏｒｍｉｓ）２００８５内切纤维素酶基因ｃｅｌｂ为拟敲除对象，利用重叠 ｒ ＰＣＲ技术将ｃｅｌｂ基因内约５００ｂｐ片段与氯霉素抗性基因（Ｃｍ）相连接，经末端单酶切后电转化至 ｒ Ｂ．ｌｉｃｈｅｎｉｆ