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环境工程微生物学课程实验指导书
Experimental Instruction Manual of Microbiology of Environmental Engineering
学 院： 资源与环境工程学院
授课对象： 环境工程09 级
学 期： 2011～2012 学年第一学期
授课教师： 雷 国 元
实验教师： 范 先 媛
实验周次： 9-10 周
系（教研室）主任：
二○一一年十月
武汉科技大学实验指导书
实验一 培养基的制备
一、实验目的
1、了解人工培养基的主要成分及一般制备原则。
2、掌握基础培养基的制造方法和过程。
二、实验内容
本次实验为微生物纯种分离、转接和培养做准备，实验内容主要包括玻璃器皿的洗涤、包装，液体
和固体培养基的制备等。
三、实验仪器、设备及材料
试管、刻度量筒、纱布、三角瓶、量筒、棉塞、电炉、天平、包装纸、棉线、玻棒。试剂和材料：
土豆、琼脂条、蔗糖。
四、实验原理
1、制备培养基的基本要求：
（1）有供微生物生长繁殖所必需的各种营养成分及足够的水分。
（2 ）有合适酸碱度，多少细菌生长适宜的pH 是弱碱性（pH7.2—7.6 ）。
（3 ）材料和容器应没有抑制细菌生长的物质（如不能用铁锅和铜锅）。
（4 ）均质通明，以便观察细菌生长现象。
（5 ）必须彻底灭菌，不得含任何活菌。
2 、制备培养基的一般程序：
称量——溶解——矫正PH 值——过滤——分装——灭菌——检验
五、实验步骤
马铃薯—葡萄糖琼脂的制备：
1、配方：马铃薯（去皮）200g、蔗糖15－20g、琼脂20－30g、蒸馏水1000mL。pH 自然。
2、步骤：
3
（1）将马铃薯洗净，去皮，切成大小约为 1cm 的小块，称200g，放入 1000mL 水中煮沸 20－30
分钟，用纱布过滤，取其液滤。
（2）定容：加水补足至1000mL。
（3）加入蔗糖至全部溶化。
（4）加琼脂至全部溶化。
（5）趁热分装试管及三角瓶。
（6）加棉塞：分装完毕后，在试管口或三角瓶口塞上棉花，以阻止外界微生物进入培养基而造成
污染，并保证有良好的通气性能。
（7）包扎：棉塞上包一层报纸，扎紧，即可进行灭菌。
固体培养基的制备：
在液体培养基中加入2%左右的琼脂即成固体培养基。
六、实验报告要求
实验报告要包括以下内容：
1、实验名称、学生姓名、学号、班号和实验日期；
2、实验目的和要求；
2
武汉科技大学实验指导书
3、实验仪器、设备与材料；
4、实验原理；
5、实验步骤；
6、实验原始记录；
7、实验数据计算结果；
8、实验结果分析，讨论实验指导书中提出的思考题，写出心得与体会。
七、实验注意事项
注意防止培养基玷污管口或瓶口，避免浸湿棉塞引起杂菌污染。
八、思考题：
1、玻璃器皿的洗涤和包装有什么要求？
2、棉塞怎么制备？
3、斜面培养基怎样制作？
4、液体培养基和固体培养基分装需要注意哪些事项？
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武汉科技大学实验指导书
实验二 培养基的灭菌
一、实验目的
为了得到某种微生物的纯培养，配好的培养基必须经过灭菌才能使用，灭菌是指用
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